植物细胞结构与植物徒手切片观察试验（二）
5. 植物细胞的内含物观察
（1）淀粉粒
取马铃薯块茎做徒手切片，先在低倍镜下观察，可见到其薄壁细胞中含有许多白色 的颗粒即淀粉粒。换高倍镜观察，可以看到淀粉粒的轮纹，并可找到具有两个脐的淀粉粒。
（2）贮藏蛋白质
取蓖麻种子，剥去种皮，用肥厚的胚乳做徒手切片。先把切片放入盛有纯酒精的培养皿中洗涤数分钟，使切片中的脂肪溶解在酒精中。然后将切片取出制成装片，在高倍镜下观察，可以看到胚乳细胞内的糊粉粒，它是由贮藏在液泡中的蛋白晶体、球蛋白体和充填的无定形的胶质共同组成的。如在切片上加一滴碘-碘化钾试剂，其蛋白质呈黄色。
（3）油滴
取蓖麻胚乳做徒手切片，并用苏丹III溶液染色，在低倍镜下观察，可看见在细胞内有被染成红色的油滴（脂肪滴）。
（4）结晶体
取秋海棠叶柄（或天竺葵茎）做横切徒手切片，在显微镜下观察，可见其基本组织细胞中常有单晶体或晶簇。
（5）花青素
将扁豆花瓣平铺在载玻片上，用刀片刮去下表皮和部分薄壁组织，将剩下的部分装片，在显微镜下观察，可见其薄壁细胞内的细胞液呈红色，这就是细胞液中的花青素显现的颜色。
6. 胞间连丝的观察
用刀片沿新鲜的经辣椒的果皮表面平行方向，切取一薄片（或把辣椒的果皮里面朝上平放桌面上，用快刀刮去肥厚物质，使之很薄），加碘液染色制片观察.在高倍镜下，可以看见其表皮是由不太规则的细胞群构成的，细胞中有着淡黄色的细胞质。细胞壁很厚，着深黄色，壁上有小孔（纹孔），孔里有细胞质穿过。
7. 细胞壁的变化
（1）细胞壁木质化
取蚕豆等草本植物的老茎做横切徒手切片，放载玻片上，先加一滴盐酸浸透细胞，稍等2—3分钟，除去多余的盐酸，再加一滴间苯三苯酚溶液（50%的酒精溶液），最后加盖玻片，在显微镜下观察。
可见有些厚壁细胞群的细胞壁着红色，这是在酸性环境中木质素与间苯三酚起的红色反应。
（2）细胞壁角质化
取蚕豆、番茄或向日葵做横切徒手切片。加一滴苏丹Ⅲ酒精试剂，染色制片镜检观察。
可见到茎的最外层表皮细胞的外侧壁着橘红色。这是茎表皮细胞外壁所沉积的角质素（脂肪类物质）与苏丹Ⅲ反应的结果。
（3）细胞壁栓质化
取土豆块茎切成1 cm左右厚度的长方块，然后沿长方块的短径表面做徒手横切切片，用苏丹Ⅲ酒精染色制片，镜检观察。
可见其表面几层细胞的细胞壁着橘红色，这就是细胞壁栓质素与苏丹Ⅲ反应的结果。
二、植物徒手切片
1. 选材
一般选择发育正常、软硬适中的植物器官或组织为材料。
所取的新鲜材料应及时放入水中，以免徒手切片时萎蔫。
材料太硬时，可用1.5 ％的氢氟酸或用甘油和70%酒精的等量混合液进行软化处理；材料太软时，可用马铃薯块茎、胡萝卜肉根等作支持物，把材料夹在其中进行切片。
对有些植物的叶片可卷成筒状进行切片或用三片双面刀片制成简易的“切刀”进行切片。
取材的大小，一般直径不超过5 mm，长度以15-25 mm为宜。
2. 切片
（1）先把欲切的材料用刀片削成大小适宜的段块，并将切面削平，然后将材料和刀片蘸水湿润（以后每切一片都要用水湿润）。
（2）用左手的拇指、食指和中指夹住材料。为防止切片时割伤手指，应使材料上端（切面）略高于食指，拇指略低于食指。用右手的拇指和食指捏住刀片一端，置于右手食指之上，刀片与材料切面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置。
（3）以均匀的力量和平稳的动作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，中途不停顿，拉切速度要快，不要推前拖后（拉锯式）切割，左手食指向下稍微移动，使材料略有上升，从而调动每张切片的厚度。切片过程中右手不动，只是右臂移动，动作用臂力而不用腕力。
（4）切片要薄、平而完整，将切下的切片用毛笔刷蘸水从刀片上轻轻移入培养皿的清水中或直接将刀片浸没于水中使切片漂洗下来。
3. 临时装片制作。
在洁净的载玻片中央滴一滴清水，用镊子在培养皿中挑选薄而透明、完整的切片放在水滴中，取干净盖片自水滴左侧慢慢斜着盖下，以免气泡产生，这样就做成了临时装片。
其他
一、作业与综合题
1. 取植物组织离析材料，制成临时装片、用显微镜观察植物细胞形态，并绘制出观察到的各种形态的细胞。
2. 选取适当的植物材料，利用徒手切片技术，分别制临时装片，用显微镜观察植物细胞的基本结构及细胞中常见的后含物，并分别绘出简图，标出名称。
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