血液培养病原菌的分布及耐药性
魏军，贾伟，周哓燕 第四军医大学学报 2005 年 12 月 第 25 卷 第 23 期 Distribution and antimicrobial resistance of pathogenic bacteria in blood culture 【摘要】 目的: 调查血液培养中病原菌的菌群分布及耐药趋势. 方法: 1995/2004血液培养标本用荧光全自动血液培养仪（Bactec9120）进行培养，阳性标本用全自动微生物鉴定仪（Vitek32）进行鉴定，药敏采用KB法. 结果: 在6207份血液培养标本中分离出病原菌662株，阳性检出率为10.7%. 病原菌以革兰阳性（G+）需氧球菌居首位（50.3%），革兰阴性（G-）需氧杆菌次之（44.7%），真菌3.0%，厌氧菌1.1%. 血液培养中的G+球菌对万古霉素和亚胺培南较为敏感，G-杆菌对亚胺培南、舒普深、丁胺卡那较为敏感. 结论: 血液培养病原菌以G+球菌为主，G-杆菌次之；儿童血液培养病原菌以葡萄球菌属为主；亚胺培南对G+球菌和G-杆菌均具有较高的敏感率. 【关键词】 血液培养；病原菌；抗药性，多药；分离鉴定 0引言
WEI Jun, JIA Wei, ZHOU XiaoYan
Lab Center, Affiliated Hospital, Ningxia Medical College, Yinchuan 750004, China
【Abstract】 AIM: To investigate the distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from blood specimens in patients with fever in our hospital from 1995 to 2004. METHODS: Blood specimens were cultured by Bactec 9120 Fluorescent Instruments. The colonies of the specimens yielding growth were identified by the Vitek32 Instruments and KB method was used for the drug sensitivity tests. RESULTS: Six hundred and sixtytwo bacteria strains were isolated from a total of 6207 blood culture specimens, with a positive rate of 10.7%. Of the identified bacteria, G+ cocci accounted for 50.3%, G- bacilli accounted for 44.7%, fungi accounted for 3.0%, and anaerobian accounted for 1.1%. The susceptibility rates of G- bacilli to Imipenem, Amikacin and cefoperazone/sulbactam were high. The susceptibility rate of G+ cocci to vancomycin and Imipenem were also high. CONCLUSION: G+ cocci prevail over G- bacilli in the blood specimens. The staphylococci are the chief bacteria in the childrens blood specimens. Both G+ cocci and G- bacilli are sensitive to Imipenem.
【Keywords】 blood culture; pathogens; drug resistance, multiple; isolated identification
血液培养阳性是确诊败血症的重要依据. 大部分患者血液中的细菌数量很低，特别是在感染早期或抗生素治疗后，通常小于1×103 cfu/L，所以提高血液培养阳性率，快速、准确地作出病原学诊断，一直是临床微生物实验室的重要课题. 为此我们回顾性分析了我院10年间血液培养结果,并对病原菌分布特点及药物敏感进行分析.
1材料和方法
1.1材料
1995/2004住院疑似败血症静脉血6207份(13~15 mL),分别注入需氧和厌氧培养瓶中；儿童取静脉血1~3 mL注入小儿培养瓶内，骨髓取适量注入小儿培养瓶内. 轻摇振荡混匀，立即转送入荧光全自动血液培养仪（Bacte 9120）内进行培养. Bacte 9120由美国BD公司出品，并采用该公司配套荧光血液培养瓶，分厌氧、需氧、小儿培养瓶3种. 全自动微生物分析系统(Vitek32)系美国生物梅里埃Vitek公司生产，鉴定卡亦由该公司提供.
1.2方法
将送检的血液培养瓶立即放入Bactec9120内培养，待其报警时取出转种血平板、麦康凯平板、沙保弱平板. 如果厌氧培养瓶报警则取出转种厌氧培养基，置厌氧环境培养，置35℃温箱18~24 h后，观察生长情况. 根据菌落形态，革兰染色结果，然后上全自动微生物分析系统(Vitek32)进行鉴定. 所用血液培养瓶及鉴定试卡均采取ATCC标准菌株，并进行质量控制. 药物敏感性试验采用ＫＢ纸片扩散法,药敏纸片为北京天坛中国生物制品药品检定所和英国Oxoid公司的产品. 结果判定按1997年美国临床实验室标准化委员会(ＮＣＣＬＳ)推荐的标准进行. 用标准菌株金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923,大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922,铜绿假单胞菌ＡＴＣＣ27853定期做药敏检测,以确保药敏结果的可靠性.
2结果
从6207份血液培养中分离出病原菌622株,阳性检出率为10.7%,其中革兰阳性菌（G+） 55.3%,革兰阴性菌（G-） 44.7%,其中G+需氧球菌50.3%, G-需氧杆菌44.1%,真菌3.0%,厌氧菌1.1%(Tab 1). 主要病原菌的耐药率见Tab 2.表1662株病原菌的分布（略）表2血液培养分离出的主要病原菌的耐药率（略）
3讨论
我们研究表明，前10位菌属分别是葡萄球菌属、埃希菌属、链球菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、肠球菌属、不动杆菌属、假单胞菌属、假丝酵母菌，它们占分离病原菌总数的88.7%. 前10位菌是金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌 、阴沟肠杆菌、中间型葡萄球菌、粪肠球菌、醋酸钙不动杆菌，占分离病原菌总数的66.9%. 表明肠杆菌科细菌和葡萄球菌属是引起败血症发生的主要病原菌，与国内外资料的报道相似［1］. 根据10 a间病原菌的分布，在疑为败血症无条件做血液培养时，首先考虑选用针对这10个菌属或10种细菌的抗生素的应用以减少盲目性.
我们对6种主要的病原菌药敏进行统计分析，金黄色葡萄球菌β内酰酶(+)为85.7%，MRSA为52.1%，提示金黄色葡萄球菌耐药性已相当严重. 对甲氧西林耐药（MRS）的葡萄球菌耐药严重，是由于细菌中产生的一种青霉素结合蛋白（PBP）发生突变，产生新的靶位蛋白（PBP2a），导致β内酰酶类抗生素的亲和力极度低下而产生耐药性［2］. 大肠埃希菌耐药性也相当严重. 总之，随着医疗技术的不断进步，各种诊疗手段不断增加，这有利败血症的发生，在这种情况下，对于患有严重基础疾病、长期大量应用免疫抑制剂、免疫功能低下或不全、以及营养不良的患者很容易交叉感染引起败血症，快速检出病原菌，根据抗生素的敏感性，指导临床合理使用抗生素，对于减轻患者的痛苦及经济负担都具有重要的意义［3-5］.
【参考文献】
［1］ 王帮，李庆兴，苏刚，等. 成人败血症与院内感染［J］. 中国微生态学杂志，2001;13(2):95-96.
Wang B, Li QX, Su G, et al. Adult septicemia and hospital onset of infection［J］. Chin J Microecol, 2001;13(2):95-96.
［2］ 张秀珍. 当代细菌检验与临床［M］. 北京：人民卫生出版社，2000:89-131.
［3］ 郭振林，崔颖鹏，陈冬梅，等. 血液培养中病原菌的分布及其耐药状况分析［J］. 中国微生态学杂志，2004;16(3):162-164.
Guo ZL, Cui YP, Chen DM, et al. The distribution and drug resistanc analysis of pathogenic bacteria isolated from blood samples［J］. Chin J Microecol, 2004;16(3):162-164.
［4］ 薄兰君,钱雅芬. 血液系统肿瘤化疗后院内感染522例分析［J］. 第四军医大学学报，2004;25(6):573-574.
Buo LJ, Qian YF. Analysis of hospital acquired infections after chemotherapy in patients with hematological malignance: 522 cases report［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2004;25(6):573-574.
［5］ 孙怡群,徐修礼,彭道荣,等. 血液及体液2675份细菌培养的临床分析与评价［J］. 第四军医大学学报，2003;24(16): 1535-1536.
Sun YQ, Xu XL, Peng DR, et al. Clinical analysis and evaluation for bacteria culture in 2675 specimens of blood and body fluid［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2003;24(16): 1535-1536.
作者简介：魏军（1961），女(汉族)，甘肃省榆中县人. 双硕士学位,主任检验师. Tel.(0951)6744340Email.Lydiajunwei@hotmail.com
(宁夏医学院附属医院中心实验室，宁夏 银川 750004)
-
项目成果
