细胞污染过程中常见的微生物污染和预防（三）
6.非同种细胞污染
即细胞交叉污染，一般来自细胞建株和细胞传代过程中两种或两种以上细胞之间的混合污染。一种是由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染，另一种情况则是提取原代细胞时在消化过程中由于剪割的组织块不够纯，消化时间把握不好，容易把杂质细胞消化混入原代细胞培养中。
二、预防细胞污染
1.室内环境
(1)细胞培养室要有操作间、缓冲间和更衣室；
(2)房间装修密闭性较高，且不宜开设外窗，无菌间的房顶、墙壁和地面均应光滑、无死角，室内应有紫外线杀菌装置；
(3)实验台和仪器布局应合理。一般来说，二氧化碳培养箱和净化工作台或生物安全柜不应对着门摆放，离心机和显微镜不应离得太远。
2.实验用品
(1)购买合格的细胞，并留种冻存，必要时可将细胞悬液加入肉汤培养基或琼脂培养基中，观察是否有微生物滋生；
(2)细胞培养所用物品的清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌；
(3)细胞培养过程中涉及到的自行配制的溶液要经过高压湿热灭菌（如水、磷酸盐缓冲溶液等）或0.22μm无菌滤膜过滤（不耐高温的溶液）、并检测确认为无菌后，方可使用；
(4)不同细胞在传代或换液时所用器具应严格区分，避免细胞间交叉污染。
3.实验人员
(1)操作人员进培养室前，必须先洗手，在缓冲间换穿专用实验服和拖鞋，严禁在实验进行时频繁出入培养室；
(2)操作要准确、敏捷、有序；
(3)吸取溶液时，应专管专用，避免交叉污染；
(4)吸管管口要向下倾斜， 以防止液体倒流进入移液器内发生污染；尽量减少细胞和培养基的敞口时间；
(5)已开口的试剂瓶尽可能的倾斜放置，防止下落微生物的污染；
(6)避免在敞口的细胞培养皿及培养皿盖上方操作；不要面对工作台或细胞培养箱讲话或咳嗽，防止口腔微生物随唾沫飞入而发生污染；
(7)若发生外溢，用蘸有消毒酒精的棉球及时擦去；
(8)实验后应将实验产生的废物和废液及时清理出培养室，并清洁无菌工作台。
三、结语
读完了本文，您是否对细胞污染有了更多的了解呢？您知道应该怎样预防细胞污染了吗？
之前Esco发过题为《如何保护您的培养细胞免受污染》一文，如果感兴趣的话，可以前往我们的官网展开了解，或者关注Esco生命科学的微信公众号：Esco_China，进一步了解更多关于细胞培养的相关内容。
