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HPLC-DAD-MS法定量分析黄芩中3种黄酮类化合物

2020.2.26

黄酮类化合物广泛分布于植物界,它们一般具有2个苯环通过中央3个碳链相互联接而成的C6-C3-C6基本构型,主要包括黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查尔酮、异黄酮类等化合物。黄酮类化合物具有多种生理活性,例如芦丁、槲皮素等能够增强心脏收缩,减少心脏搏动数;水飞蓟素具有保肝作用等。常用黄酮类化合物及制剂的含量测定方法有：1.光度法由于其方法的简便、快速,使用仪器简单、便于推广应用。在中草药中用光度法测定黄酮的相关报道也很多,主要有紫外分光度法、荧光光度法以及紫外-可见分光光度法等;

　　2.高效液相色谱法，黄酮类HPLC分析通常用反相C18柱色普柱由于黄酮分子中存在酚羟基流动相中加入少量的酸可改善峰形。表一为采用高效液相色谱法测定中草药中黄酮类化合物的相关报道;

　　3.毛细管电泳电化学方法在药物分析、植物中五种黄酮化合物的检测上已获应用;

　　4.化学发光法作为一种有效的痕量分析技术,因具有灵敏度高,线性范围宽,而且分析快速、重现性好、自动化程度高等特点,在分析化学领域得到了迅速发展。

　　综上4类检测方法的分析比较,高效液相色谱法无疑是使用最多,也是准确度最为可靠的分析方法,但是分析时间相对长、分离效率低、即使采用梯度洗脱技术也难使某些成分完全分离,且仪器比较昂贵,色谱柱易被污染而且污染后难于清洗,使柱的使用寿命缩短,在工业中不易推广;紫外分光光度法准确度比较高,但检测过程中样品不纯产生强烈干扰,测定误差较大,而且要使用亚硝酸钠有害物,使得此方法受到很大限制;荧光光度法受到Fe3+ 干扰较大;化学发光法操作简单、可靠、快速,单次测定时间短。流动注射化学发光法因仪器较为廉价,灵敏度高,而且分析快速、自动化程度高等特点应在黄酮类化合物检测中受到广泛关注,但是稳定性略差。毛细管电泳法因为其高效、高速的分离分析特点也备受关注,近几年在中草药成分分析中逐渐得到应用推广,但是价格较昂贵。

　　近期，河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所研究人员发表论文，旨在分析比较高效液相色谱-二极管阵列检测器-质谱(HPLC-DAD-MS)法和高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法检测黄芩中3种黄酮类化合物的结果。研究指出，与HPLC-DAD法相比，HPLC-DAD-MS法含量测定结果更准确，且操作简便、重现性好，可用于黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素的含量测定。该文发表在2014年第06期《承德医学院学报》杂志上。

　　分别采用HPLC-DAD-MS法和HPLC-DAD法检测黄芩中3种黄酮类化合物黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素的含量。HPLC-DAD-MS法测得黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素的含量分别比HPLC-DAD法平均少6.61%、73.98%和10.90%，其中汉黄芩苷的含量相差较大。

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