红细胞Rh血型系统检查
要点1：
Rh遗传基因位于第1号染色体的短臂上，Rh血型有3个紧密相连的基因位点，每一位点有一对等位基因（D和d，C和c、E和e），这3个基因是以一个复合体形式遗传。3个连锁基因可有8种基因组合，即CDe、cDE、cDe、CDE、Cde、cdE、cde和CdE，两条染色体上的8种基因组合可形成36种遗传型。
要点2：
Rh抗原命名为C、D、E、c、d、e，虽从未发现过d抗原及抗d活性，但仍保留“d”符号，以相对于D。因此，Rh抗原只有5种，有相应5种抗血清，可查出18种Rh表现型。临床上，习惯将有D抗原者称Rh阳性，而将虽有其他Rh抗原而无D抗原者称为Rh阴性。D阴性人中最常见的基因型为cde／cde。
已发现40多种Rh抗原，与临床关系最密切的5种为D、E、C、c、e，这5种抗原中D的抗原性最强，对临床更为重要。
DU（弱D）：为一组弱D抗原。尽管DU的抗原性较D为弱，但仍是Rh阳性细胞，所以将DU血输给Rh阴性受血者时，仍有引起产生抗D的可能性，因此应将DU型供血者作Rh阳性处理，而DU型受血者归入Rh阴性则较为安全。如果把DU血输给有抗D者，也可以产生严重的溶血性输血反应。
-D-：-D-/-D-遗传基因型红细胞只有D抗原，而缺乏C、c、E、e抗原。此型能与抗D抗体在盐水中凝集。
要点3：
Rh抗体中，除偶尔可见天然的抗E、抗CW抗体外，其余各种Rh抗原的抗体多系输血或妊娠时，由外来红细胞免疫刺激后产生。这些抗体均为IgG，但在免疫应答的早期，也可有IgM成分。
D抗原是非AB0红细胞抗原中免疫性最强的抗原，可以引起抗D的产生，抗D与D红细胞产生严重的溶血反应。习惯将D阴性者认为是Rh阴性，多不再进行其他Rh抗原检测，除D抗原外，通常抗E和抗c比较多见。抗CW及抗其他Rh抗原的抗体偶尔也可引起迟发性溶血性输血反应或新生儿溶血病。
要点4：
红细胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清检测来鉴定。虽然Rh血型系统中有许多种抗原，但常规只用抗D血清检查有无D抗原。当有特殊需要如家系调查、父权鉴定、配血不合等情况时才需用抗C、抗c、抗E、抗e等标准血清做全部表型测定。Rh抗体属IgG，不能在盐水介质中与红细胞发生凝集，因此必须采用以下几种鉴定方法。
1.低离子强度盐水试验：可提高抗D抗体与D阳性红细胞结合率，并提高其灵敏度。
2.酶介质法：木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸，使红细胞膜失去电荷，缩小红细胞间的距离；同时酶还可以部分地改变红细胞表面结构，使某些隐蔽的抗原得以暴露，增强凝集性；且对IgG的作用大于IgM，故有利于检出不完全抗体。
试剂：IgG型抗D标准血清、1%木瓜酶（或菠萝蛋白酶）溶液、5%D阳性红细胞生理盐水悬液、5%D阴性红细胞生理盐水悬液。
要点5：
注意事项：
①Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生，血清中很少有天然抗体，故不需要做反定型。
②对照：酶易失活，故每次试验都要设置阳性对照。若阳性对照不出现凝集，表明酶或抗血清已经失效。酶活性过强出现假阳性结果，因而要设立阴性对照，以排除假阳性。只有在阳性对照管出现凝集而阴性对照管不凝集的情况下，才说明被检管的结果是可靠的。
③结果阴性：说明被检红细胞上无相应抗原，但由于DU抗原性弱，因此，如被检者无凝集，还应进一步检查以排除DU的可能。
要点6：
（四）交叉配血法
Rh血型系统的交叉配血的原则与AB0血型系统的交叉配血相同。由于此系统的抗体为不完全抗体，故应选用酶介质法、抗球蛋白法或聚凝胺法等。
要点7：
质量控制
1.严格设定试剂和抗原阳性和阴性对照系统。
2.严格控制反应条件：试验介质、浓度、温度、离心、反应时间等条件。
3.受检者红细胞必须洗涤干净，以免血清蛋白中和抗球蛋白，出现假阴性。
要点8：
Rh血型系统临床意义
抗Rh抗体主要通过输血或妊娠免疫而产生，较大量的Rh阳性（D抗原阳性）细胞进入Rh阴性者体内后，2～5个月内血浆中可测到抗体，如经再次免疫，3周内抗体浓度可达高峰。
受血者或孕妇血浆中含有Rh抗体时，当再与含相应抗原血液相遇，将引起严重输血反应或新生儿溶血病（常为第2胎溶血）。因此Rh抗体具有十分重要的临床意义。
