生化仪双波长测定中辅助波长的选择
双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。脂血样品中的脂质吸收光谱从300～600ｎｍ均有吸收,呈逐渐下降的趋势；溶血样品中的血红蛋白在350ｎｍ、400ｎｍ、540ｎｍ、580ｎｍ有4个吸收峰；黄疸样品中的胆红素在300～500ｎｍ均有吸收,在400～500ｎｍ之间有强吸收峰。由于脂血、溶血、黄疸样品在较宽的波长范围内有较强的吸收光谱存在,因而常常同测定波长有重叠,此时测得的吸光度包含待测物质的吸光度和干扰物质的吸光度,选用辅助波长可消除干扰物质的吸光度。在辅助波长选择中,根据测定波长选择辅助波长,要求干扰物质在测定波长同辅助波长有相同的吸光度。例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340ｎｍ,对于溶血样品,血红蛋白在340ｎｍ有较强吸收,其吸光度同380ｎｍ处吸光度相同,选用380ｎｍ作辅助波长,用340ｎｍ和380ｎｍ两波长的吸光度之差测定无机磷,可消除溶血对测定的干扰。
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