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血脂仪的检测原理

2021.12.25

  血脂包括多种指标,测定方法也因不同的指标而不同,最基本的包括总胆固醇、甘油三酯和血高密度胆固醇(HDL)

  l、总胆固醇(TC)

  酶法(COD-PAP法)

  原理:血清中的胆固醇约1/3为游离胆固醇,2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯。胆固醇酯被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢,再经过氧化物酶催化,使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应,生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。醌亚胺的最大光吸收在500nm左右,吸光度与标本中TC含量成正比。

  正己烷抽提L-B反应显色法

  原理:用氢氧化钾乙醇液使血清蛋白变性,并使胆固醇酯水解为胆固醇。加水后用正己烷分溶抽提,可从碱性乙醇中定量地提取胆固醇(达99.7%)。提取的胆固醇溶液中除少量其它固醇(人血清中约含胆固醇的1%)以外,基本上不含干扰物。故测定结果与同位素稀释-气相色谱质谱法(决定性方法)接近。

  2、甘油三酯

  酶法(COD-PAP法)

  原理:用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中三酰甘油(TG)水溶解成甘油与脂肪酸,将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。以磷酸甘油氧化酶(GOP)氧化3-磷酸甘油(G-3-P),然后以过氧化物酶(POD),4-氨基安替比林(4-APP)与4-氯酚(三者合称PAP)反应显色,测定所生成的H2O2,故本法简称为CPO-PAP法。

  变色酸显色法(CDC参考方法)

  原理:用二氯甲烷提取血清TG,同时加入硅酸去除磷脂、游离甘油、甘油一酯、部分甘油二酯及蛋白。TG经氢氧化钾皂化生成甘油,酸化后以过碘酸氧化甘油产生甲醛,用亚砷酸还原过剩的过碘酸后,甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色反应,然后比色测定。

  3、血高密度胆固醇(HDL)

  匀相测定法

  基本原理有以下几类:PEG修饰酶法(PEG法)、选择性抑制法(SPD法)、抗体法(AB法)、过氧化氢酶法(CAT法)

  超速离心结合选择性沉淀法

  美国CDC采用本法测定参考血清的靶值,并用于评价常规方法的准确性,被认为是测定HDL-C最准确的方法。此法分三步:超速离心—选择性沉淀—HDL-C测定。

  硫酸葡聚糖-Mg沉淀法

  原理:以硫酸葡聚糖DS50(MW50000±5000)与镁离子沉淀血清中含apoB的脂蛋白[LDL,VLDL,Lp(a)],测定上清液中的HDL-C。[2]

  4、血低密度胆固醇(LDL)

  匀相测定法

  基本原理有以下几类:增溶法(Sol法)、表面活性剂法(SUR法)、保护法(PRO法)

  β-定量法

  本法为超离心结合选择性沉淀法。超离心、选择性沉淀二步骤与HDL-C参考方法相同,只是,Chol测定时除测定沉淀后上层的HDL-C外,还同时测定超离心后的下层液(含HDL和LDL)胆固醇。

  PVS沉淀法

  原理:血清中聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚(PVS)选择性地沉淀LDL,离心后上层液中含HDL,VLDL和CM,用胆固醇测定酶试剂分别测定上层液和血清总胆固醇含量,二者之差即LDL-C含量。

  Friedawald公式计算法

  Friedawald原公式按旧单位mg/dl计算,假设血清中VLDL-C为血清TG量的1/5量计(以重量计)则:LDL-C=TC-HDL-C-TG/5。按法定计量单位mmol/L计算,则应为LDL-C= TC-HDL-C-TG/2.2。

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