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琼脂糖凝胶电泳时loadingbuffer中两条带分不开

2023.5.19

可能有几种原因导致琼脂糖凝胶电泳时loading buffer中两条带分不开:

1. 样品中含有类似大小、相似电荷密度的多个DNA分子,使得它们在凝胶上迁移的速度和距离非常相似,难以区分。

2. 凝胶电泳分离过程中进行的步骤未正确执行,如电泳结束前,未将片断完全迁移到凝胶一端。

3. 凝胶的电场或电泳缓冲液的pH或离子强度等参数未正确调整,导致DNA片段无法完全分离。

为了解决这个问题,可以尝试以下方法:

1. 改变电泳缓冲液的pH、离子强度或添加其他化学试剂,使得DNA片段之间的差异更加突出。

2. 将不同大小或电荷密度的DNA分子分别电泳或者改变DNA的切割方法,切出不同大小的DNA片段,从而使得各个带之间的差异更加显著。

3. 将样品稀释到低浓度,以减少每个带上的DNA分子数量,使得分离更加明显。

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