1. 方法一 (1)采血
静脉采血0.5 ml,肝素抗凝,用小方瓶培养,加培养液5 ml;
培养液组成为:含20 %小牛血清的Eagle液,加PHA 40 μg/ml;
(2)培养
置37 ℃温箱培养48 或72 小时,以1000 rpm离心8 分钟;
(3)固定
3 L 1甲醇/冰醋酸固定3 次,每次15 分钟,离心沉淀固定液;
(4)制片
冷冻载片滴片法制片、自然干燥;10 %Giemsa(pH6.8)染色15 分钟。
2. 方法二
(1)采血
肝素抗凝血0.5~0.6 ml,置10 ml试管中,加入血量一半的0.5 %甲基纤维素,充分混合; (2)培养
置37 ℃温箱静置培养30 分钟,以2000 rpm离心10 分钟,去上清液;
(3)制片
做涂片,Wright法染色。
3. 方法三
(1)采血
用三棱针刺无名指取血0.6 ml,立即注入内径3 mm、长5 cm的血液沉淀管中,用小玻棒搅拌除去纤维蛋白;
(2)加明胶
加入3 %的明胶(其量为血量的1/3或1/2),小心混匀,置37 ℃温箱自然沉降50 分钟;
(3)吸去上清液、离心、沉淀物涂片、自然干燥、Wright染色30 分钟、再用Giemsa染色2 分钟。 展开 |