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微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

2019.9.17

微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

实验步骤	1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。 2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。 3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。 4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。 5. 加入50μl荧光（FITC或PE）标记的第二抗体，室温下避光染色30min。 6. 上流式细胞仪检测。展开
注意事项	1. 新鲜全血一般室温下放置8小时以内可以使用，时间过长会使活性降低，影响测定结果。 2. 抗凝血应保证无血块凝集。 3. 全血加入试管中时，应尽量避免加到试管壁上，如沾到了管壁上必须用用棉签擦净，否则会影响细胞二维点图的细胞群的分离效果。

实验步骤

1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。

2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。

3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。

4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。

5. 加入50μl荧光（FITC或PE）标记的第二抗体，室温下避光染色30min。

6. 上流式细胞仪检测。

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注意事项

1. 新鲜全血一般室温下放置8小时以内可以使用，时间过长会使活性降低，影响测定结果。

2. 抗凝血应保证无血块凝集。

3. 全血加入试管中时，应尽量避免加到试管壁上，如沾到了管壁上必须用用棉签擦净，否则会影响细胞二维点图的细胞群的分离效果。

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