1.4 方法
1.4.1 洗板 所有试剂回温至室温。将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释10 倍。将酶联免疫板取出,放在室温下平衡5min。每孔加入300uL
洗液,放置1min ,再甩掉洗涤液,重复3 次,将板内残留洗涤液在吸水纸上甩干。
1.4.2 竞争 试剂盒中的抗体按1∶1000 倍稀释。加样时在板上按1 到3 的顺序加入标样,每孔100uL
,重复两次,其它孔加入待测样品,每孔100uL
抗体,注意加入抗体时不要让枪头沾染孔里的样品与标准样,然后将酶标板放入湿盒里,在37摄氏度下竞争30min。
1.4.3 加二抗 试剂盒中的二抗标记酶按1 :1000 稀释。在酶联板上每孔加200μL
配制好的二抗标记酶,将其放入湿盒,置37摄氏度、30min。
1.4.4 加底物显色 取底物A、底物B 按等体积混匀,在酶标板上每孔加200μL 配好的底物显色板显色,显色后每孔加入50uL
的终止液终止反应。在酶标仪上测定各标准样和各样品450nm 处的光密度(OD)值,用瘦肉精标准液200ng/mL 孔作为0孔。