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蛋白质纯化都需要哪些设备?

2020.3.10

做好一项实验,好的实验设备是少不了的,尤其是现如今大部分实验室经费都还充足的情况下,以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,仅供参考。

(1)、超声波细胞破碎机

适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。

(2)、高压匀浆机

大规模生产用,对菌体量无限制。破菌效果好,但要注意冷却。

(3)、高分散乳化机

均匀悬浮菌体用,比搅拌快,均匀性好,特别适合于大规模生产。另外,大规模生产时缓冲液的配制很有用,可快速溶解、混匀。推荐品牌:IKA 国产品牌:FLUKO;

(4)、中空纤维超滤柱

大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。

(5)、高速冷冻离心机

小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf

(6)、磁力搅拌器

就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。推荐品牌:国产的都行,最好配4或6工位的。

(7)、真空泵

离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌:Millipore WP61型。

(8)、过滤器

同真空泵配合使用。推荐品牌:Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。

(9)、pH计

缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌:梅特勒

(10)、电导仪

就是测定缓冲液及样品的电导了。

(11)、纯水仪

如果没有管道系统的纯水设备,那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。推荐品牌:MINI Q

(12)紫外可见分光光度计

测定蛋白浓度。推荐品牌:Beckman,岛津

(13)、核酸蛋白检测仪

纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器,就必须要了。

(14)、蠕动泵

简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌:兰格、GE公司P50。

(15)、纯化系统

高级的纯化系统了。推荐品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。

(16)、膜超滤器

蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用国产的兰格)

(17)、蛋白电泳仪

SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌:Bio-Rad。

(18)、脱色摇床

电泳染色、脱色用。

(19)、制冰机

破菌时冷却用。

(20)、恒温培养箱

融合蛋白酶切去除tag时恒温用,做ELISA时用。

(21)、凝胶成像仪

就是给电泳胶及WB拍照片用,要配照片打印机哦。就是一台数码相机,硬件各品牌没有本质差异,主要看那家的软件做的好,界面友好。

(22)、电磁炉

加热电泳样品。

(23)、微波炉

电泳考染脱色。加热水,溶解尿素、硫酸铵等。

(24)、微量取样器

就是枪了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的,可以用刻度吸管。推荐品牌:Gilson,eppendorf

(25)超净工作台

做蛋白样品的无菌过滤用。

(26)、冰箱

不说了。

(27)、电风扇

小量样品的浓缩风干。

(28)、电子天平

称重了。两种精度:0.1mg和0.01g。推荐品牌:梅特勒

(29)、空调

这个我相信大家都不会反对,也是蛋白纯化对环境的要求。

(30)、超声波清洗机

缓冲液脱气用,当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时,有机溶剂与水相混溶时脱气。

(31)、酶标仪、洗板机

测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时,SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。

(32)、恒温干燥箱、干烤箱

恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥,设定温度40-60度。

干烤箱用于干烤灭菌,内毒素去除等,设定温度180-220度。

(33)、酸缸

就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东,对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。

(34)、UPS电源

保护层析设备,防止数据丢失。

(35)、层析冷柜 低温冷室

4度双门的那种大冷柜,可以把层析柱放进去,对温度敏感的蛋白纯化需要。

冷室作用同上,更彻底,只是运行费用更大。

(36)、冷冻干燥机(器)、

蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。


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