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Buccutite™-全新一代的蛋白交联技术的原理与运用(一)

2021.3.01

       Buccutite™交联技术提供了一种将蛋白质与另一种大分子(例如抗体或酶)偶联的有效方法。与常用的SMCC交联技术相比,Buccutite™交联技术更结实,产率更高,它利用两个独特的排他性的接头:Buccutite™MTA 和Buccutite™ FOL,每个基团末端都具有一个与胺反应的基团,该基团专门与所需标记蛋白质上的伯胺反应。另一端包含我们专有的Buccutite™反应性基团,该基团仅结合其各自的Buccutite™MTA / FOL交联剂对应物具有高度亲和力。当两种基团同时存在时,两种结合物会在Buccutite™反应位点共价连接在一起,形成蛋白质-蛋白质结合物。

 

 

       我们的Buccutite™交联技术提供了最方便,最有效的交联方法,以高共轭产率连接两种生物分子。我们的方法使用一对交联剂:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。MTA被添加到一个分子上,而FOL被添加到另一分子。通过混合Molecule-1-Buccutite™MTA和Molecule-2-Buccutite™FOL引发交联反应。该交联反应在极其温和和中性的条件下发生,不需要催化剂,这些独立产品可以适应研究人员的特定材料和要求。

 

       目前,我们提供独立的Buccutite™MTA和Buccutite™FOL试剂,以扩展Buccutite™交联技术的应用,MTA被添加到一个分子,而FOL被添加到另一分子,然后通过混和1分子的Buccutite™MTA和1分子的Buccutite™FOL引发交联反应,共轭试剂类型包括NHS酯,scavengers和Dye 650。

 

       1. 单独的Buccutite™FOL和MTA产品:

 

货号 产品名称 规格
5350 Buccutite™FOL,NHS酯 2 umoles
5355 Buccutite™MTA,NHS酯 2 umoles
5360 Buccutite™FOL scavengers 2 umoles
5365 Buccutite™MTA scavengers 2 umoles
5370 Buccutite™MTA-Dye 650 2 umoles
5372 Buccutite™FOL-Dye 650 2 umoles

       

       2. HRP抗体偶联试剂盒

 

       Buccutite™过氧化物酶(HRP)标记抗体试剂盒可用于制备辣根过氧化物酶(HRP)可直接标记含有游离氨基基团的蛋白质,肽和其它配体缀合物。我们试剂盒中提供的HRP已通过我们专有的链接器Buccutite™FOL进行了预激活,可以直接用于缀合。整个过程仅需要两次简单的混合,而无需进一步纯化。Buccutite™FOL活化的HRP在极温和的中性条件下无需催化剂即可轻松与Buccutite™MTA分子发生反应。

 

       Buccutite™过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒

 

货号 产品名称 规格
5503 Buccutite™过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒*针对标记100 ug蛋白进行了优化* 1 kit
5504 Buccutite™过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒*针对标记1 mg蛋白进行了优化* 1 kit
5505 Buccutite™过氧化物酶(HRP)抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化* 2次标记

 

       3. 快速标记和交联试剂盒

 

       抗体样本快速标记步骤

 

       Buccutite™快速标记和交联试剂盒提供了一种快速,简单和有效的技术,可以在微量的抗体上标记PE,APC或串联染料。它利用两个独立的接头Buccutite™MTA和Buccutite™FOL。这些接头被分别标记到藻胆蛋白或目的抗体上,并且当混合时会牢固结合在一起,从而形成抗体-藻胆蛋白偶联物。

 

 

Buccutite™交联技术用于蛋白质-蛋白质缀合的简单过程

 

       (1)快速蛋白质交联试剂盒

 

 

快速蛋白质交联试剂盒中Buccutite™生物缀合系统的原理图

 

       使用我们专有的一对交联剂:Buccutite™MTA和Buccutite™FOL,Buccutite™快速蛋白质交联试剂盒(Cat# 1315)旨在提供一种简便方法来生产高产率的偶联抗体。有效的系统可以简化如下:将MTA添加到一种蛋白质中,而将FOL添加到另一种蛋白质中。蛋白质-蛋白质交联反应是通过将Protein-1-Buccutite™MTA和Protein-2-Buccutite™FOL混合而引发的。

 

       (2)快速抗体标记试剂盒

 

       Buccutite™快速标记试剂盒,以促进PE与抗体和其他蛋白质(例如链霉亲和素和其他辅助试剂)的结合,Buccutite™快速抗体标记试剂盒提供了一种强大而便捷的方法来标记您的抗体。标记好的抗体适用于WB,ELISA和IHC应用。每个试剂盒均提供预活化的APC或PE,以促进与抗体和其他蛋白质(如链霉亲和素和其他辅助试剂)的结合。我们的预活化材料已准备好进行共轭,比传统繁琐的基于SMCC的共轭化学具有更高的产率。该试剂盒包括一个反应缓冲液,每个足以进行2个标记反应。整个过程仅需要两次简单的混合,而无需进一步纯化。任何新抗体的最佳比例都必须通过实验确定,但是每个试剂盒都包含一个协议,其中推荐量供用户参考根据具体实验进行调整。

 

       用于快速标记和交联试剂盒的快速抗体标记试剂盒:

 

货号 产品名称 规格 Ex Em
1310 Buccutite™快速PE抗体标记试剂盒*针对每次反应可标记100 ug抗体的微尺度优化* 2次标记 565 575
1312 Buccutite™快速PE抗体标记试剂盒*针对每次反应标记25 ug抗体的微级优化* 2次标记 565 575
1311 Buccutite™快速APC抗体标记试剂盒*针对每次反应可标记100 ug抗体的微尺度优化* 2次标记 651 662
1313Buccutite™快速APC抗体标记试剂盒*经过微尺度优化,可标记每个反应25 ug抗体*2次标记651662


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