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用琼脂糖凝胶电泳分析核酸有哪些影响因素

2021.10.28

核酸电泳中所用到的eb能用sybrgreen,goldview替代。

GoldViewⅠ是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型DNA染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。通过小鼠皮下注射实验,尚未发现GoldViewⅠ有致癌作用;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用GoldViewⅠ代替EB不失为一种明智的选择。

SYBR Green I 核酸凝胶染液(SYBR Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,SYBR Green I 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经SYBR GreenI 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的性价比,没有背景荧光。为获得最佳的结果,凝胶最好在跑胶后再进行染色。SYBR GreenI 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。

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