硝酸盐氮的测定—紫外分光光度法设计
硝酸盐氮的测定—紫外分光光度法
1原理
通过硝酸根离子在220nm波长处的吸收值从而可定量测定硝酸盐氮浓度。但同时溶解的有机物在220nm 处和275nm处均有吸收，而硝酸根离子在275nm处没有吸收。因此，在275nm处作另一次测量，以校正硝酸盐氮的吸收值。本方法适用于清洁地面水和未受明显污染的地下水中硝酸盐氮的测定，其检出硝酸盐氮浓度范围为0.08mg/L~4mg/L。
2 实验用品
2.1仪器：1000ml容量瓶、250ml容量瓶、试管若干、最大量程分别为5ml、1ml、0.2ml的移液枪一支、分光光度计；
2.2药品：硝酸钾、1mol/L盐酸；
2.3试剂配制
(1) 硝酸盐氮标准溶液(100mg/L)：称取0.7218g经105～110℃干燥2h的硝酸钾溶于水中，移入1000ml容量瓶，用水稀释至标线，混匀(加2ml氯仿作保存剂，至少可稳定6个月)；
(2) 硝酸盐氮工作液：移取25ml标准溶液至250ml的容量瓶定容，此工作液硝酸盐氮浓度为0.01mg/ml；
3 方法
3.1标准曲线
取7支10ml比色管，按表加入试剂，用25px石英比色杯在紫外分光光度计上，用蒸馏水做参比调零，测定A220和A275，绘制标准曲线。
编号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
硝酸盐氮标准工作液体积/ml（含氮0.01mg/ml） | 0 | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 |
蒸馏水稀释定容至10ml | |||||||
浓度/(mg/L) | 0 | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 |
加入1mol/L盐酸 0.25ml | |||||||
A220 | 0.007 | 0.136 | 0.246 | 0.381 | 0.463 | 0.586 | 0.656 |
A275 | 0.001 | 0.004 | 0.002 | 0.008 | 0.004 | 0.009 | 0.012 |
Ar= A220-2 A275 | 0.05 | 0.128 | 0.242 | 0.365 | 0.455 | 0.568 | 0.632 |
A=Ar-Ar(0) | — | 0.123 | 0.237 | 0.360 | 0.450 | 0.563 | 0.627 |
以编号1~6的数据（红色字体的数据）作标准曲线，横坐标为配制成溶液硝酸盐氮浓度（mg/L），纵坐标为A；
3.2水样测定
分别取水样1ml（必要时可以用稀释后水样代替，记下稀释的倍数D）至10ml比色管中，加水稀释至约10ml，记录稀释倍数，加入1mol/L盐酸 0.25ml，振荡摇匀后进行显色和测量吸光值A220和A275。以蒸馏水参比调零（此全过程应与标准曲线同时操作）；
编号 | 0 | A | B | C | D | E | F | … |
水样/ml | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | … |
蒸馏水稀释定容至10ml | ||||||||
1mol/L盐酸/ml | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | … |
A220 | … | |||||||
A275 | … | |||||||
A=A220-2A275 | … | |||||||
A=Ar-Ar(0) | ||||||||
浓度/(mg/L) | … | |||||||
3.3 水样中硝酸盐氮浓度按下式计算：
ρN（NO3-）= [(10×A) /(b×V) ] ×D
式中：
ρN（NO3-）——原水样中硝酸盐氮浓度，mg/L，以N 计；A——试样校正后的吸光值（A= A220-2×A275）；
b——标准曲线的斜率；
V——所取试样的体积，ml；
D——稀释倍数（水样未经稀释时此值为1）；
4 注意事项
氨基磺酸的作用是掩盖蒸馏水中可能含有的亚硝酸盐氮对吸光值的干扰，而其本身对吸光值干扰很小。当亚硝酸盐氮浓度低于0.1mg/L时，可以不用加0.8%（m/V）氨基磺酸溶液（即标准曲线可以选择不加此试剂，而水样测定时需在测定水样亚硝酸盐氮浓度后再决定是否添加，同时其计算也需因此进行变动）。
