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普瑞邦饲料中伏马毒素HPLC检测(一)

2020.6.16

伏马毒素起因和特性

伏马毒素主要是由串珠镰刀菌菌f.moniliforme和f.proliferatum在一定温度和湿度条件下繁殖所产生的次级代谢产物。直到1988年,南非和美国的研究人员才首次从霉变的玉米中分离出伏马毒素(fumonisins)b1。到目前为止,发现的伏马菌素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4和FP1共11种。粮食在加工、贮存、运输过程中易受上述两种真菌污染,特别是当温度适宜时,更利于其生长繁殖,从而产生出一类结构性质相似的毒素,其中FB1是其主要组分占60%以上,其毒性也最强。因此,伏马毒素可以通过粮食加工、饲料生产等过程对畜牧业乃至人类健康产生较严重的危害。

伏马毒素纯品为白色针状结晶,为一类相关的极性、水溶性代谢产物,为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物,对热很稳定,不易被蒸煮破坏,在多数粮食加工处理过程均比较稳定。

食品污染状况

FB1对食品污染的情况在世界范围内普遍存在,主要污染玉米及玉米制品,其污染的饲料主要为以玉米为原料的饲料。FB1为水溶性霉菌毒素,对热稳定,不易被蒸煮破坏,所以同AFT(黄曲霉毒素)一样,控制农作物在生长、收获和储存过程中的霉菌污染仍然是至关重要。

伏马菌素对玉米的污染率和污染水平受国家和地区、玉米品种、季节的影响。1995年~1996年,Amra等对从埃及不同省份收集的120份样品进行了检测,结果显示,冬季收集的白玉米和黄玉米FB1污染率均为最高。伏马菌素还可以污染其他粮食及其制品,且不同地区污染状况也存在差异。

1996年我国对玉米、小麦等粮食作物中FB1污染进行调查。发现不同地区均有不同程度污染。我国食道癌高发区林县的玉米伏马菌素污染率为48%。因此,人们怀疑该地区食道癌高发与食用污染此毒素玉米相关。该毒素已被世界卫生组织列为近年来首先进行研究的几种霉菌毒素之一。

伏马毒素的危害

1.马大脑白质软化症              
  这是一种马的神经失调疾病。根据1988年南非研究人员的试验结果,每天以0.125mg/kg体重的水平给马进行皮下注射,大约7天后马开始发疯、发狂,冲撞栏杆而死。解剖发现马的大脑呈现白质软化症状。1989年,玉米中的伏马毒素给美国有很多州的农业和畜牧业造成了巨大的损失。               
  2.猪肺水肿             
  1992年和1994年美国和南非的科学家研究表明,每天伏马毒素的摄取量在0.4mg/kg体重以上均可引发猪的肺水肿,还可造成猪生殖系统的紊乱,如早产、流产、死胎和发情周期异常等。这种病在美国及其他国家都有发现。
  3.小鼠肝癌              
  1991年南非科研人员对小鼠进行了伏马毒素的毒理试验,试验结果表明伏马毒素引发肝癌。1998年又对大鼠进行了伏马毒素毒理试验,获得相同的结果。                
  4.人类食道癌              
  早在1988年南非科学家就对食道癌发病率高和低的地区进行过调查,食道癌发病率与主食玉米受伏马毒素污染呈正相关,进一步的动物试验也得到了相同的结果。1994年中国学者和日本学者对食道癌高发区的河南省林县进行了一次调查,发现该地区主食玉米中伏马毒素水平高达30~50mg/kg,发霉玉米中伏马毒素最高值达118.4mg/kg。目前伏马毒素引发食道癌的机理还不清楚,需进一步确证和研究。 

各国对伏马毒素的限量标准

2001年美国食品与药物管理局(FDA)发布了供人类食用的玉米和玉米产品伏马毒素最高限量指导性公告,规定人类食用玉米中伏马毒素最高限量为2mg/kg;同时,FDA的畜牧医学中心(CVM)也发布了动物饲料中伏马毒素的最高限量指导性公告,规定其限量范围为1~50mg/kg。


              表2  FDA对伏马毒素在动物饲料中的推荐限量标准(2000年6月)

 

 玉米及其副产品用于下列动物饲料

 推荐限量标准(FB1+FB2+FB3),mg/kg

 马和兔

 5ppm(不超过日食量的20%)*

 猪和鲶鱼

 20ppm(不超过日食量的20%)*

 产子的反刍动物、家禽、貂

 30ppm(不超过日食量的20%)*

 大于3月用于屠宰的反刍动物、用于制作裘皮的貂

 60ppm(不超过日食量的20%)*

 用于屠宰的家禽

 100ppm(不超过日食量的20%)*

 其他各种牲口和宠物

 10ppm(不超过日食量的20%)*

 *以干基作为计算基准


伏马毒素的检测

伏马毒素的检测先后使用过薄层色谱法、气相色谱法、酶联免疫法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)等,目前研究和应用得最多的是利用免疫亲和柱净化后的荧光仪检测法和HPLC法。


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