什么是蛋白聚集体的控制？
1. 移除或修饰热点(hot spot)
蛋白质一级序列及其高阶结构可以决定蛋白质的聚集倾向,移除或修饰聚集体热点(易聚集倾向序列)可以减缓蛋白质的聚集。可以通过分析蛋白质及疏水表面来实现。常常一个点突变可有效减少蛋白质的聚集。此外,通过连接亲水结构来屏蔽热点区域的聚集也可以减少蛋白质聚集。如PEG化、糖基化等。
2. 调整溶液配方
结构修饰会存在导致生物功能改变的风险,蛋白质也常通过调整配方来稳定蛋白质从而减少聚集。该方法主要是调整溶液的pH、离子强度以及稳定剂。
最常用到的稳定剂是减少蛋白表面聚集的表面活性剂,其包括PS、烷基糖类、氨基酸衍生物等。表面活性剂通过潜在地减少蛋白质自结合、吸附、蛋白与其他易聚集物质的相互作用来减少蛋白质的聚集。糖类是另一种常用的蛋白质稳定剂,其主要通过增强构象稳定性来减少蛋白质的聚集倾向。除此之外,多元醇、氨基酸、聚胺等也被证明可以减少蛋白质聚集。其中值得注意的是,精氨酸也是有效减少蛋白质聚集的添加剂,其主要被认为是通过静电相互作用、疏水相互作用、阳离子-π相互作用等降低蛋白质表面疏水性而使蛋白质稳定,从而减少聚集。
3. 冻干
如果蛋白质聚集不能通过控制配方来实现,则冻干是通常可以选择的另一种方法。由于冻干过程可能会诱导蛋白质聚集,开发最佳的冻干过程来较少冻干诱导的聚集也是需要的。
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