通过HPLC分析谱图进行反相Flash制备方法开发案例分享
具体实验方法如下:
◆HPLC 分析方法:
(1) 亲水性化合物
样品浓度: 2 mg/mL(in water)
色谱柱: Biotage® Scaling Column 4.6 mm ID x 25 cm[Part No. S1UL-0401-93050]
柱温箱温度: 25℃
进样量: 3µL
流速: 1.0 mL/min.
溶剂: A) water B)MeOH
梯度: 10% B (1CV) → 10-100% B (3CV)→100% B (2CV)
(2) 亲脂性化合物
样品浓度: 4 mg/mL(in MeOH)
色谱柱: Biotage® Scaling Column 4.6 mm ID x 25 cm[Part No. S1UL-0401-93050]
柱温箱温度: 25℃
进样量: 2.5 µL
流速: 1.0 mL/min.
溶剂: A) water B)MeOH
梯度:: 25% B (1CV) → 25-100% B(10 CV)→100% B (2CV)
◆Flash 中压制备系统 - Biotage®Selekt 分离方法
(1) 亲水性化合物
样品浓度: 2 mg/mL(in water)
色谱柱: Biotage®Sfär C18 D 12 g [Part No. FSUD-0401-0012]
进样量: 5 mL
流速: 12 mL/min.*
溶剂: A) water B) MeOH
梯度: 10% B (1 CV) → 10-100% B (3 CV)→100% B (2CV)
(2) 亲脂性化合物
样品浓度: 400 mg/mL(in acetone)
色谱柱: Biotage® Sfär C18 D 12 g [Part No.FSUD-0401-0012]
进样量: 0.5 mL
流速: 12 mL/min.*
溶剂: A) water B) MeOH
梯度: 25% B (1 CV) → 25-100% B (10 CV)→100% B (2CV)
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