糖、有机酸、乙醇的快速分析
生物乙醇的生产过程中,为了随时监控生物质发酵过程中乙醇的转换过程,需要短时间内进行分析。分析对象为低聚麦芽糖及其构成糖葡萄糖,以及最终产物乙醇、乳酸、醋酸、甘油等7种成份。
以下是使用Shodex SH1011 8C分析以上7种成份的应用实例介绍。Shodex SH1011 8C是长10cm的快速分析用色谱柱。填料为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,是同时具备尺寸排阻和离子排阻模式的复合色谱柱,可以进行糖和有机酸的同时分析。而且和长30cm的本公司同类产品相比,分析时间缩短为原先的3分之1,可以实现糖和有机酸的快速分析。
规格和使用条件
1.规格
填料:苯乙烯-二乙烯基苯共聚物
柱管材质:SUS316
2.使用条件
色谱柱特点
1.快速分析
如下图所示。包含了乙醇的7种样品,使用常规流速1.0mL/min进行分析。流动相使用硫酸水溶液,分析温度65℃,整个样品的分析时间在6分钟以内完成。色谱柱长度同为10cm,和其他公司的产品相比,Shodex SH1011 8C的乙醇理论塔板数为同类产品的2倍。
2.流速对分析的影响
生物乙醇原料的发酵过程需要反复确认,所以必须短时间内完成分析。以下是流速设置从0.5mL/min~1.5mL/min,取得的谱图比较。Shodex SH1011 8C使用最大流速1.5mL/min,能在4分钟内完成高速分析。
各流速乙醇的理论塔板数如下图所示,即使是使用1.5mL/min的高流速理论塔板数也仅降低很少。
3.填料批号的再现性
下图为三个批次填料填充柱的再现性测试。如图所示,各成分的分离谱图以及保留时间均有良好的再现性。
4.检量线
下图为各成分的检量线。所有的成份在0.02~1%的浓度范围均能得到R²为0.999的线性良好的检量线。
5.通用设备和半微量设备的分离比较
Shodex SH1011 8C在通用LC设备上也能使用,但配合半微量设备能达到更好的分离效果。如下是比较谱图,使用半微量设备,乙醇的理论塔板是为使用通用设备时的1.2倍左右。
6.糖、有机酸、乙醇的保留容量
如下图所示,3种糖,13种有机酸,2种醇类的分离谱图。下面的表格为硫酸浓度和保留时间的关系。虽然流动相中的硫酸浓度,对糖和醇类的保留时间没有影响,但是会影响有机酸的保留时间。所以推荐根据样品中的成份选择合适的硫酸浓度。
1)糖
2)有机酸
3)醇
总结
SH1011 8C是本公司原有产品SH1011的快速色谱柱,使用1.0mL/min的流速可以在6分钟内分析7种相关成分。可以运用于生物醇类生产过程中的品质监控。
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