生物分析三剑客应用案例 | Merck双特异性抗体表征方法建立
牛IgG具有高达70个氨基酸的超长CDR-H3结构域。之前发现,具有牛的CDR-H3的HIV中和抗体会识别gp120 CD4结合位点上的表位,该表位通常凹陷于常规抗体。所以超长CDR-H3抗体可能会识别一些人抗体无法识别的隐蔽表位,并扩大抗体识别的靶点区域[1]。
牛源CDR-H3双特异性抗体的产生示意图。通过牛抗体文库筛选出针对两个靶标(以红色和黄色显示)的识别序列。嫁接到人源Fab支架上,利用重链异源二聚技术(例如SEED技术)组装成双特异性抗体。
主要技术路线
Octet®高通量筛选高亲和力双特异性抗体
Octet®基于生物层干涉技术(BLI),是被美国药典认可的用于亲和力检测的标准方法。Octet®具有高通量和易使用等特点,成为生物医药企业必备工具之一。在Merck的这个方案中,Octet®被选择作为抗体亲和力检测的主要方法。
iQue®高通量流式检测细胞水平结合
科研人员使用iQue® 3高通量流式细胞仪评估细胞结合,并使用仪器配套智能软件ForeCyt®进行分析。iQue®高通量流式具有检测速度快,样品耗量少等特点,是细胞水平高通量筛选的常用仪器。
Incucyte®实时监测杀伤效果
对于免疫细胞杀伤实验,Incucyte®实时活细胞分析系统可以在不移动细胞培养板的情况下,对细胞状态进行实时荧光拍摄,不需要对细胞进行悬浮处理,并且具备高通量特性,可同时放置6块96或384孔板。
赛多利斯生物分析部门始终致力于智能、可靠的高通量药物表征及筛选方法的开发。无论在药物研发还是在基础研究中,生物分析三剑客—Octet®分子互作分析系统、iQue®高通量流式细胞仪和Incucyte®实时活细胞分析系统,都能够分别从分子互作水平、细胞互作水平和细胞成像水平中提供更高效,更便捷的解决方案,让大家在竞争激烈的市场中占有一席之地!
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-参考文献-
Structural Basis of Broad HIV Neutralization by a Vaccine-Induced Cow Antibody. Sci Adv (2020) 6:eaba0468. doi: 10.1126/sciadv.aba0468
Grabbing the Bull by Both Horns: Bovine Ultralong CDR-H3 Paratopes Enable Engineering of ''Almost Natural'' Common Light Chain Bispecific Antibodies Suitable For Effector Cell Redirection. Frontiers in Immunology, 01 Jan 2021, 12:801368
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