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肿瘤免疫｜免疫检查点研究细胞分析方案
肿瘤免疫学是近年来非常热门的研究领域，其主要利用机体的自身免疫系统来与癌症抗争。与传统的手术、化疗和放射治疗不同，免疫治疗是肿瘤的新兴治疗方式、开启肿瘤免疫研究新时代。免疫治疗通过适应性免疫系统来识别和特异性杀灭肿瘤细胞，而使正常机体细胞不受损伤。正是如此，肿瘤免疫学研究将会从原理机制上揭示如何激发机体的免疫原性、如何促进免疫作用长期保护我们，且避免肿瘤复发。免疫检查点抑制剂、CAR-T细胞治疗及肿瘤疫苗这些突破性成果都展示了免疫系统的强大能力以及如何用来抗击癌症。
图1. 肿瘤免疫学涵盖了适应性免疫反应中的各个阶段，其中包括免疫检查点抑制剂、CAR-T细胞治疗及肿瘤疫苗。
免疫检查点抑制作用
免疫检查点的作用是稳定正常免疫反应，以及在免疫系统被激活时保护正常细胞免受损伤。肿瘤细胞干扰免疫检查点，通过它们来避免被免疫系统识别。因此，理解肿瘤细胞和免疫细胞之间的反应，这是肿瘤免疫学研究的主要方法之一。
在机体内，有很多种T细胞的调节方式，其中包括T细胞受体（TCR）。比如，PD-1/PD-L1是一对相互抑制的蛋白，能“掩饰”肿瘤细胞被T细胞识别，从而防止被T细胞攻击。靶向PD-1/PD-L1通路并结合PD-1的抗体药物可以抑制共抑制作用，这样T细胞识别肿瘤细胞，发挥CD8 T细胞的细胞杀伤作用。
还有很多在APC细胞和T细胞之间共刺激和共抑制的受体-配体作用。在T细胞激活或抑制作用中，T细胞必须通过TCR识别到同源抗原，然后与共刺激或共抑制的受体-配体反应，如下图所示。
图2. 在APC细胞和T细胞之间共刺激或共抑制的受体-配体反应。结合共刺激或共抑制受体的膜上分子重要家族是B7-CD28家族（紫色文字），所有B7家族及其配体属于免疫球蛋白超家族。另一主要信号家族是肿瘤坏死因子（TNF）家族（绿色文字），在细胞因子刺激后参与调节T细胞激活。
免疫检查点细胞分析研究方案
在免疫治疗中，探索发现并鉴定验证有效的生物标志物能够帮助科学家优化治疗效果、降低治疗毒性及思索多种治疗方法的相互结合。探索并优化实验流程，从基因水平上发现和验证靶点，到蛋白及细胞分析生物标志物，我们与您一起更好地鉴定生物标志物在免疫检查点治疗中的疗效。
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抗体
Invitrogen™ 抗体
使用一抗、二抗及流式抗体等高级验证抗体来检测关键检查点靶标。
FOXP3
Human TIGIT
Human LAG3 (CD223, PD1, CTLA4, TIM3及VISTA)
ARG1, IDO和NOS2
Granzyme B (和GM11)
Invitrogen™ Panel Builder 流式配色工具
轻松五步选择设备、抗原、荧光、克隆及产品，完成多色流式配色。不仅选择了抗体和荧光染料，还可以使光谱重叠减少，搞定肿瘤免疫实验配色。
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细胞增殖检测
Invitrogen™ CellTrace™ 细胞增殖试剂盒
使用荧光染料永久标记，追踪细胞的增殖、分裂及传代，且不影响细胞形态状态。
在实验中，根据细胞群内的荧光强度，确定从细胞被标记开始起的细胞传代次数。
CellTrace试剂盒在药物研发中检测细胞健康、细胞毒性、肿瘤细胞抑制增殖状态。
CellTrace细胞增殖试剂盒选择指南
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Invitrogen™ Click-iT™ EdU试剂盒
其原理是将EdU插入新合成的DNA中，使用光稳定性高的Alexa Fluor染料或Pacific Blue来标记，最终由特异性高且快速的Click-iT Plus技术完成检测。
允许与常见有机染料（FITC、Alexa Fluor等）、PE及PE串联染料及荧光蛋白（GFP、mCherry等）同用。
Click-iT Plus EdU细胞增殖试剂盒选择指南
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免疫分析
Invitrogen™ ELISA、ProQuantum™ 高灵敏免疫试剂盒，ProcartaPlex™ 多因子试剂盒以及Quantigene多基因试剂盒都可以用来定量分析细胞因子、趋化因子、生长因子及其他免疫标志物。
ELISA试剂盒：可提供特异和灵敏的方法，来测量和监测血清、血浆或细胞培养上清液中的这些生物标志物。
ProcartaPlex™ Immunooncology Checkpoint Markers Panel：多重免疫检查点试剂盒可以同时检测和定量多种分泌蛋白，如细胞因子、趋化因子和生长因子等。
Quantigene™ Plex Assay：在肿瘤切片中可以准确检测RNA含量，以便定量分析生物标志物。我们有超过17,000种验证过的基因，帮助您定量分析信号通路和疾病相关基因表达水平。样本制备试剂盒可以节省您的样本，在单孔内检测更多的基因。
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技术支持服务
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