T/NAASS 058-2023
牛冠状病毒夹心法酶联免疫吸附试验抗原检测技术规程

Technical specification for detection of bovine coronavirus ELISA antigen by sandwich method

非常抱歉，我们暂时无法提供预览，您可以试试： 免费下载 T/NAASS 058-2023 前三页，或者稍后再访问。

如果您需要购买此标准的全文，请联系： 。

注意： 点击下载后，生成下载文件时间比较长，请耐心等待......

标准号

T/NAASS 058-2023

发布

2023年

发布单位

中国团体标准

当前最新

T/NAASS 058-2023

 

 

适用范围

3　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 牛冠状病毒 Bovine coronavirus, BCV 牛冠状病毒属于冠状病毒科，是引起新生犊牛腹泻、成年牛呼吸道感染的重要病原。　     夹心法酶联免疫吸附试验Sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA  夹心ELISA法是将已知的特异性抗体包被在固相载体上，加入待测样本和针对该抗原的酶标抗体，其中的相应抗原即可与载体上的抗体和酶标抗体特异结合，洗去未结合的材料和酶标抗体，加入酶的底物，由呈色反应来测定抗原。 4　夹心法酶联免疫吸附试验 试验准备 实验环境、仪器与设备、洗液的制备、稀释液的制备、示踪剂工作液的配制按照试剂盒说明书规定执行。实验环境的生物安全条件应符合GB/T 19489的要求，稀释用蒸馏水应符合GB/T 6682的要求。 检测样品 采集牛粪便样品加入等体积的样品稀释液，自然沉淀10 min，无需离心，吸取粪便溶液的上清液于1.5 mL离心管中。 操作程序 使用前将所有试剂恢复至18 ℃～24 ℃，轻轻摇动或旋转，使试剂混合均匀。 4.3.1　取板 取出微孔板，并在操作记录表上标记样品的位置。如果使用微孔板的一部分，则只需取出足够检测样品的条数。未使用的微孔板条用锡箔纸包好，保持干燥与密封，2 ℃～8 ℃保存。 4.3.2　加样 每孔加样品，A1与B1孔中加入样本1，C1和D1孔中加入样本2，以此类推。同样方法加入阳性对照（例如G1和H1）。 4.3.3　感作 将微孔板封板后，按照试剂盒说明书中指定的时间进行室温孵育。 4.3.4　洗涤 弃去微孔板中液体，用300 μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在洗涤时以及在加入下一步试剂之前要防止反应板出现干燥现象，避免孔内产生气泡，在最后一次甩掉后，在吸水材料上用力扣板，吸去剩余的液体. 4.3.5　加酶结合物 每孔加入酶结合物，摇匀。密封后按照试剂盒说明书中指定的时间进行室温孵育，按步骤4.3.4的步骤进行洗涤。 4.3.6　加底物 每孔加入底物溶液。加入孔中的底物溶液必须完全无色。按照试剂盒说明书中指定的时间进行室温避光孵育。 4.3.7　加终止液 每孔加入终止液终止反应。 4.3.8　测定吸光值（OD值） 酶标仪预热15 min，在加入终止液5 min内读取试剂盒说明书中指定波长的吸光度值（OD）。 实验有效性检测 只有当满足试剂盒说明书规定的条件时检测才有效。 结果计算 使用试剂盒说明书指定的计算公式进行结果计算。 结果判定 使用试剂盒说明书规定的判定标准进行结果判定。

T/NAASS 058-2023相似标准

推荐