微生物数字PCR系统可将微生物DNA的核酸PCR反应体系均匀分割成数万个反应微滴,每个微滴平行、独立完成PCR扩增,通过判定每个微滴扩增完成后荧光信号的有无进行统计,最后根据泊松分布公式计算得到原体系中微生物靶标基因的初始浓度或拷贝数。微生物数字PCR系统可应用在:病原微生物检测、细菌载量测定、病毒载量测定、微生物基因相对表达研究、病原微生物荧光PCR结果确认、微生物二代测序结果验证等领域。...
微滴数字PCR的原理,就是把原来一整管的PCR反应液,分散成几万个,甚至几百万个极微小的液滴。这些小微滴同时进行PCR反应,这样就可以计算出原来的反应液当中,有多少个目标基因的拷贝了。...
——微滴式数字PCR 微滴式数字PCR技术能够确定样品中待测靶分子的绝对数目,不再依赖Cq值或内参基因,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目。 微滴式数字PCR在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理,即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴,其中每个微 滴或不含待检核酸靶分子,或者含有一个至数个待检核酸靶分子。...
一般而言,定量PCR的检测灵敏度约在1%,NGS的灵敏度可达到1%,而数字PCR的检测下限可轻松实现0.01%。甲基化含量鉴定传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题,不能获得甲基化程度的精确定量,而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的绝对拷贝数定量,为甲基化程度的精确定量检测提供了一种可靠的技术。...
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