推荐以下对照设定: (1)阳性对照:重组细胞因子或确定能分泌该种细胞因子的细胞 阴性对照:相同数量的未刺激细胞 背景对照:无菌细胞培养液 检测抗体对照:用PBS代替检测抗体二、ELISpot技术介绍 从单细胞水平观察分泌蛋白的表达已成为目前研究细胞功能的重要内容,酶联免疫斑点法(ELISpot)技术巧妙地运用了酶联免疫吸附技术,从方法上解决了该难题,已广泛运用于各项重要课题研究中。...
实验方法原理ELISPOT技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作台细胞培养箱移液器枪头离心管ELISPOT板实验步骤一、ELISPOT包被 1. ...
然后加入酶标记的链亲和素(二抗),孵育后洗去多余酶标链亲和素(二抗)。最后加入酶的底物,作用后可形成不溶的颜色产物即斑点(SPOT)。每个斑点是激活的淋巴细胞分泌的细胞因子区域,代表一个活性淋巴细胞。实验结果可在显微镜下观察或使用酶联免疫斑点自动图象分析仪(BioReader 4000 Pro-X)来进行计数分析。...
-底的免疫斑点板或者平底的酶标板 ELISpot技术要点 1. ...
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