大体积分子无法进入凝胶孔洞而被排阻,仅从凝胶颗粒间的空隙中通过,较先从柱上被洗脱,而小体积分子可以进入凝胶孔洞而受到更强的滞留,较缓慢的从柱上洗脱下来,从而实现不同尺寸的分子达到分离。通过该方法可快速地获得高分子的平均分子量及其分布范围情况。本方法参考中国药典(2015 版)采用凝胶色谱法分析肝素钠的平均分子量。请点击文末“阅读原文”下载原文!↓↓↓↓↓↓...
当样品分子量较大,以至于被完全排除在固定相微孔之外时(全排阻),其保留体积等于色谱柱内微粒间的空隙体积;而分子量足够小的分子可以完全进入微孔中,其保留体积为空隙体积和固定相中微孔体积之和。固定相的分子量测定范围即为全渗透和全排阻之间的分子量范围。...
体积排阻色谱原理分子的体积排阻,样品组分和固定相之间原则上不存在相互作用,色谱柱的固定相是具有不同孔径的多孔凝胶,在固定相确定的分子量范围内,洗脱顺序按照分子大小分布。...
高分子在溶液中的体积决定于相对分子量、高分子链的柔顺性、支化、溶剂和温度,当高分子链的结构、溶剂和温度确定后,高分子的体积主要依赖于相对分子量。基于上述理论,GPC/SEC的每根色谱柱都是有极限的,即:排阻极限和渗透极限。...
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