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染色15分钟后即可观察,视野中明亮荧光的“彗星”被光照时间一般不易超过2分钟,以免荧光剂快速衰退而不宜继续观察和拍照。(2) 彗星的图像分析主要靠肉眼显微镜读片,对DNA损伤程度标准的正确判断是非常重要的。不同程度损伤可根据彗星的尾部与其头部的比率大小分为0、1、2、3、4五个等级。0级无拖尾表明无损伤,当DNA损伤程度由轻到重,则彗星的尾部逐渐变长变大,头部逐渐变小荧光强度逐渐变弱。...
(5)在肿瘤生物学中的其它应用和展望 “彗星”分析可与其它单细胞检测技术结合应用,包括作用于DNA药物的抗体或磁性免疫珠,将来通过免疫学分析与DNA损伤分析相结合的方法,可能获得关于药物耐受的进一步信息。例如“彗星”分析可以告诉我们一个细胞的DNA未损伤,而上述方法则可以告诉我们是由于药物未达到细胞还是细胞对药物无反应。...
可以看出,上排DNA无断裂损伤的样品,每个细胞呈现圆形,而有DNA损伤的样品则有明显的彗星状拖尾。 得到了清晰的图像之后,如果需要测定DNA损伤的情况,就必须要进行精确的图像分析。通常来说,DNA损伤用于评估基因毒性需要测定两个指标:% DNA in Comet Tail(慧尾DNA%) 及 Tail Moment(尾距)。...
彗星实验,又称单细胞凝胶电泳实验,是用来检测几乎所有有核细胞中 D N A 损伤的方法。彗星实验与其他遗传毒性检测实验相比有明显优势,但是由于它对实验中的细微变化非常敏感,可导致结果变化较大。本章的目的在于提供环境毒性实验中与碱性彗星实验相关的背景信息和详细的标准化操作流程。...
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