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即: D=kd/(T1/2) 式中:D为凝胶筛孔的平均直径,d为多聚体分子直径,k为常数。 凝胶总浓度可在3%~30%之间变化。凝胶总浓度过高,凝胶硬而脆,易破碎。凝胶总浓度过低,凝胶稀软,不易操作。(2)交联度(C): 交联度表示凝胶溶液中交联剂占单体和交联剂总量的百分含量。 ...
实验概要Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳,将分子量大小不同的RNA分离开来,随后将其原位转移至固相支持物(如尼龙膜、硝酸纤维膜等)上,再用放射性(或非放射性)标记的DNA或RNA探针,依据其同源性进行杂交,最后进行放射自显影(或化学显影),以目标RNA所在位置表示其分子量的大小,而其显影强度则可提示目标RNA在所测样品中的相对含量(即目标RNA的丰度)。...
1.1 毛细管的柱材料 毛细管色谱柱的材料对制备是十分重要的,好的柱材料应该是惰性的、热稳定、内表面光滑、容易润湿及操作使用方便等。早期使用的柱材料有聚乙烯管[1]、尼龙管、不锈钢管[2]以及玻璃管等。随着玻璃毛细管柱改性方法的不断发展和石英毛细管柱的出现,毛细管柱材料几乎都是以二氧化硅为主要成分的玻璃管和石英管。...
由于聚丙烯酰胺凝胶有突出的优点,因而四十年来得到广泛的应用,目前尚无更好的支持介质能够取代它。其主要的优点有:①可以随意控制胶浓度“T”和交联度“C”,从而得到不同的有效孔径,用于分离不同分子量的生物大分子。②能把分子筛作用和电荷效应结合在同一方法中,达到更高的灵敏度:10-9 ~10-12 mol/L。...
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