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样品浓缩物中的病毒通常通过基因法和培养法进行定性或定量检测。PCR法可检测病毒基因,目前最常用于检测环境和临床样品中的特定病毒。PCR法的流行主要由于其检测速度往往比培养法快得多,而且提供了物种和菌株特异性的鉴定,以及可以检测目前无法进行体外培养的病毒。PCR法的缺点是它们无法表征病毒感染力,而且需要开发合适的引物。因此,如果引物设计不当或病毒已在目标基因组区域发生突变,则可能无法检测到病毒。...
表1 荧光RT-PCR法检测肠道病毒核酸的重复性试验(略) 2.5 样本的检测 从浙江省各地报告的病毒性脑炎、手足口病、急性出血性结膜炎和急性心肌炎等等疑似肠道病毒感染疫情患者的脑脊液23份、粪便20份、疱疹液8份和眼拭子7份等临床样本中直接提取病毒RNA,用建立的荧光RT-PCR方法检测肠道病毒核酸。结果显示,58份样本中肠道病毒核酸阳性的有32份。...
避免和破坏乳化的方法有:混合震摇时,轻缓的固定一个方向震摇;采用高速离心振荡或振荡后再用玻璃棉或滤纸过滤;加盐到水相,通常有NaCl固体、2%~5%NaCl溶液或Na2SO4溶液。加入少量另一种有机溶剂,如无水乙醇。四、样品的浓缩目的:从样品中萃取的分析物浓度如果在定量限之上,那么在色谱分析时将没有干扰,可直接进行测定。但当被测化合物的浓度较低时,需要在净化和测定前将萃取液浓缩。...
7检测前准备工作使用前所有试剂和样本需放置于室温,静置 15分钟。建议所有的实验样本和标准品做复孔检测。洗涤液:从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇混匀,待结晶完全溶解后再配制洗涤液。依据所需用量计算浓缩洗涤液使用量,可将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成工作浓度的洗涤液。未用完的放4°C。...
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