【摘要】目的:控制柚枳实的质量。方法:紫外分光光度法;检测波长284nm。结果:柚皮苷在5.0—30.0μg/ml范围内。浓度与吸收度呈良好的线性关系,回归方程:C=31.81A一0.0004,r=0.9997;平均回收率:100.6%,RSD=0.67%。结论:操作简便,结果准确,适用于原料质量控制。
柚枳实为芸香科植物柚Citrus grandis(L.)Osbeck干燥幼果,产地主要是广西、陕西、四川、江西等地。柚枳实主含柚皮苷(Naringin)、枳属苷(Poncirin)等,其中柚皮苷除具有抗炎、抗菌、抗病毒、抑制眼醛糖还原酶等作用外,同时也是制备新型甜味剂——柚苷二氢查耳酮的主要原料,现已广泛应用。为控制其质量,本实验对柚枳实进行柚皮苷的含量测定。
1.仪器与试药
仪器日本岛津UV-2401PC型紫外分光光度计;柚皮苷对照品(批号:0722—200108中国药品生物检定所)。乙醇为分析纯;柚枳实的产地是广西。
2.方法与结果
2.1对照晶及供试晶溶液的制备
对照品溶液的制备:取柚皮苷对照品2Omg(120℃干燥至恒重)精密称定,置lOOml量瓶中。加乙醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:精密称取2.Og柚枳实细粉。置索氏提取器中,加乙醇回流1.5小时,溶液于水浴上蒸干,残留物精加乙醇lOOml使溶解后,过滤,弃去初滤液。精密吸取续滤液lml,置lOOml量瓶中,加乙醇至刻度,精密吸取lOml,置50ml量瓶中,加乙醇至刻度。即得。
2.2测定波长的选择
对照品溶液及供试品溶液在200~40Onm进行扫描。均在226nm和284nm处有最大吸收峰,现选择284nm作为检测
波长。
2.3线性关系的考察
精密吸取上述对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分别置于25ml量瓶中,用乙醇稀释至刻度,摇匀。在284nm处测定吸收度。得回归方程C=31.81A一0.0004,r=0.9997(n=6)。结果表明,柚皮苷在5.0~30.Oμg/ml范围内,浓度与吸收度呈良好的线性关系。
2.4回收率试验
精密称取柚皮苷对照品适量,加乙醇溶解并稀释,配成不同浓度的溶液。精密吸取本品5ml,置50ml量瓶中,用乙醇稀释至刻度,摇匀。以乙醇为空白,在284nm波长处测定吸收度。
2.5精密度试验
取一定浓度的供试品溶液,测定吸收度,RSD为0.54%(n=5)。表明本法精密度良好。
2.6重现性考察
取同一批样品,按样品制备方法平行制备5份,依法测定,平均含量为13.28%,RSD为0.53%,表明重现性良好。
2.7稳定性试验
取上述对照品溶液及供试品溶液于室温分别放置0,2,4,6,8小时后,测定吸收度,结果表明,本品溶液室温条件下在8小时内吸收度无变化。
2.8供试品测定
取供试品溶液于284nm处测定吸收度,计算供试品含量。
3.讨论
3.1中国药典(2000年版)一部枳实项下测定柚皮苷含量是以甲醇为溶剂,而本实验采用的是乙醇,结果柚皮苷在乙醇中稳定性好,避免了甲醇对人体的侵害。
3.2实验结果表明,用紫外分光光度法测定柚枳实中柚皮苷的含量,具有时间短、操作简便及结果准确等优点,适用于企业原料质量控制。