河蚬中活性蛋白CFp-a 的分离纯化及其活性

摘要:采用硫酸铵分级沉淀,Blue Sepharose 6 Fast Flow、SP Sepharose Fast Flow 和HPLC柱层析,从河蚬( Corbicula fluminea) 中分离纯化蛋白CFp2a。经SDS2PAGE 测定,其分子量为24. 0 kD;经苯酚硫酸法测定,其含糖量为2. 3 %。10～160μg/ mLCFp2a 分别处理肝癌细胞BEL7404 72 h 后, 采用四氮唑还原法(MTT) 检测癌细胞的生长活性,结果显示,CFp-a 对BEL7404癌细胞生长的抑制率在24. 6 %～79. 2 %。采用质量浓度为20μg/ mL 和40μg/ mL 的CFp2a 分别处理BEL7404 48 h 后,用流式细胞仪(FCM) 检测细胞凋亡,可以在DNA 直方图上观察到典型的亚“G1”峰,凋亡率分别为10. 99 %和15. 51 %。