大鼠胰岛细胞的分离纯化及培养

【摘要】　目的　探讨大鼠胰岛细胞分离纯化和培养的方法。方法　采用胰导管逆行灌注Hanks 液分离成年大鼠胰岛, Ⅴ型胶原酶消化,不连续密度梯度Ficoll 400 纯化胰岛。用台盼蓝和双硫腙染色检测胰岛活性和纯度,葡萄糖刺激胰岛素释放试验检测胰岛功能。结果　胰岛细胞的收获量为540 ±150 个胰岛P胰腺,活性> 90 % ,纯度>90 % ,高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激的2 倍多。结论　胰导管灌注Hanks 液, Ⅴ型胶原酶消化和不连续密度梯度葡聚糖纯化胰岛,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛。