菠菜和水稻细胞色素b_559的分离纯化及其光谱性质研究

采用一种快速简捷的方法从菠菜 Spinacia oleracea L. 和水稻 Oryza sativa L. 中分离纯化了光系统Ⅱ反应
中心内的细胞色素 b-559,并且研究了其低温可见光区荧光光谱、室温紫外区荧光光谱、吸收光谱以及电泳特性
该方法的主要特点:1. 以放氧核心复合物为起始材料以避免其他细胞色素的干扰;2. 选用 DEAE-Sephacel 为层析
介质 ,用等度洗脱除去杂蛋白和叶绿素;3. 用同一介质不同条件去除过量的去垢剂。从两种植物中分离纯化的
Cytb-559具有相似的吸收光谱 ,在非变性电泳中有相同的泳动特征。用修订的适用于分析小蛋白的 Tricine-SDS-
PAGE证明 ,从两种植物中分离得到的 Cytb-559都是由两个多肽亚基组成 ,它们的表观分子量分别为9kD和 4kD
低温荧光光谱的结果表明 ,Cytb-559的荧光激发峰位为413nm和439nm, 荧光发射峰位在 563nm和 668nm,首次
证明 Cytb-559可以发出荧光并将电子传递给叶绿素。首次通过 Cytb-559的紫外荧光光谱证明 Trp 残基位于该蛋
白的疏水跨膜区内。