重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达_分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究
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下一篇 2008-10-01 00:23:04/ 个人分类:分离纯化
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本项研究建立了高效稳定表达可溶型 TRAIL重组融合
蛋白的
工程菌 ,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导
肿瘤细胞凋亡活性的研究。结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的 30%左右 ,亲和层析纯化后 ,重组融合蛋白的纯度可达95%以上。其表现分子量约为22kD,等电点为6129,N- 末端的氨基酸顺序与理论值相同。该融合蛋白在浓度为011~1g/mL 时 ,能显著诱导所试全部 7 种肿瘤细胞株细胞凋亡 ,不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡;对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用 ,但不杀伤正常人外周血淋巴细胞;动物实验研究表明 ,能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长 ,而对正常小鼠无任何毒性。结论:该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡 ,具有重要临床应用前景。
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