RBX 诱骨活性成分的分离与纯化

摘　要: 目的　重组合异种骨(RBX) 作为一种新型植骨材料在临床治疗骨缺损、骨不连等病例中取得了显著疗效. 需进一步研究重组合异种骨中诱骨活性蛋白的相对分子质量范围. 方法　采用肝素亲和层析技术纯化RBX 中诱骨活性蛋白即骨形态发生蛋白(BM P) , 利用小鼠肌袋实验检测其骨诱导活性, 再用聚丙烯酰胺电泳(SDS2PA GE) 测量RBX 中诱骨活性蛋白纯化后的相对分子质量. 结果　在纯化近20 倍后,获得8. 23 mg 高度纯化的蛋白质, 组织学观察其活性发现植入小鼠股部第10 日, 有大量软骨细胞及软骨岛的出现, 在局部区域还可见到条索状骨小梁出现, SDS2PA GE 电泳发现这种蛋白质的相对分子质量为35×103, 经还原后单体的相对分子质量为22×103. 结论　重组合异种骨(RBX) 中35×103 的蛋白质经还原后为22×103, 其单独使用具有异位成骨活性,为RBX 的临床应用提供了理论依据.