环境样品中DNA 的分离纯化和文库构建

摘　要:采用研磨/ 冻融和SDS/ 蛋白酶K热处理等理化方法,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA。所获得纯品DNA 的产量为每克样品2～16μg。对纯品DNA进行限制性内切酶处理后,构建了以pUC18 为载体的DNA 文库。建库效率为从每克环境样品获得约103～104 个含3～8kb 外源随机插入片段的克隆。通过DNA 序列测定和基因注释,对从文库中随机选取的克隆进行了分析,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因。本文所做的尝试对于保存、研究和开发未培养微生物基因资源具有意义。