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浅析体外MTT实验在抗癌药物临床前药效评价上的作用

上一篇 / 下一篇  2020-01-20 16:42:25

实用的肿瘤细胞生长与存活的评价方法在肿瘤研究中至关重要。在抗肿瘤药物临床前药效评价中,常会采用体外MTT药效学实验探讨化合物对肿瘤细胞体外生长的抑制效应,或者体内移植瘤药效学实验探讨化合物对肿瘤动物移植瘤生长的抑制效应。MTT显色法是一种常用于评价肿瘤细胞生存状态的方法,近年来备受关注。

四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法可以在肿瘤细胞光镜下外形尚未明显变化时,通过细胞内是MTT转化为其formazan的脱氧酶类活性来反映肿瘤细胞的变化,在抗癌药物抑瘤研究中应用较为广泛。通过MTT法,可以观察化合物对体外培养的肿瘤细胞株的生长的抑制作用,来评价该化合物的抗肿瘤活性。

在临床前药效学评价中,采用MTT显色法可以评价化合物的细胞毒性以及抗肿瘤药物的敏感试验。如有研究者在体外研究中,以穿心莲有效部位(AEP)为模型药物,以小鼠乳腺癌细胞4T-1和小鼠肺癌细胞LLC为模型,采用MTT,考察药物对肿瘤细胞增值的抑制作用。研究发现AEP对肿瘤细胞的增殖具有明显的生长抑制作用,并呈时间、剂量依赖性,与空白对照组相比差异有显著性。美迪西提供药物安全性评价服务,其建立了符合国际标准的药物安全评价体系,实验研究遵循ICHCFDAFDAOECD指导原则,可为客户提供高质量的数据、快速的研究周期的临床前药物安全性评价服务。

还有研究者探讨了蒲公英根提物(DRE)和紫花地丁全草水提物(VE)对人源性乳腺癌细胞株(MCF-7)和人源性肝癌细胞株(HepG2)的增殖抑制率及细胞活性的影响[1]。研究者制备了不同药物质量浓度梯度的DREVE,作用于MCF-7细胞和HepG2细胞,用细胞形态学分析、AO/PI双染法、MTT法以及线粒体膜电位检测法等探究2种抗癌药用植物对2种癌细胞在生长活力、抑制增殖能力及线粒体膜电位变化等方面的影响。结果通过MTT法检测可知,药物作用48 h,MCF-7细胞抑制效果较好的为DRE,质量浓度为6.0 mgmL-1时抑制效果最佳,细胞致死率达92.53%;HepG2细胞抑制效果较好的为VE,质量浓度为6.0 mgmL-1时抑制效果最佳,细胞致死率达93.46%,2种细胞的细胞活力均下降,线粒体膜电位也呈下降趋势。

也有研究者提取柴胡愈伤组织活性成分(BSW-ws,对培养的肝癌细胞SMMC-7221给药,给药浓度分别为:10,20,30,40,60,80,100μgmL-1;再用MTT法检测BSW-ws的细胞毒活性,并经流式细胞仪检测BSW-ws对细胞凋亡的影响[2]。通过MTT法检测BSW-ws的细胞毒活性结果显示,当给药浓度为60μgmL-1时达到IC50值。

MTT比色法是一种可以快速地量化检测活细胞数量的方法,其结果较为可靠,已经被广泛地用于细胞实验。MTT法可以用于肿瘤和真菌细胞活性检测、肿瘤细胞药敏检测、抗肿瘤要打大规模筛选等,因此体外MTT药效学实验在临床前药效学评价中应用也较为广泛。相信随着科学技术的发展和MTT比色法的不断完善和改进,其在药物研发领域的应用汇越来越广,作用也将会越来越大。

[1] 蒲公英和紫花地丁水提物的抗癌活性研究[J].

[2] 柴胡愈伤组织提取物抗肝癌效用研究[J].


TAG: mtt实验临床前药效抗癌药物

 

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