RNA甲基化——如何进行M6A RNA甲基化定量检测？

RNA甲基化是RNA的可逆翻译后修饰，其表观遗传地影响许多生物过程。它发生在不同的RNA中，包括tRNA，rRNA，mRNA，tmRNA，snRNA，snoRNA，miRNA和病毒RNA。不同的RNA-甲基转移酶具备相应的催化策略，用于RNA甲基化。

RNA甲基化主要的修饰类型有两三种：一种是6-甲基腺嘌呤（m6A），是在存在于真核生物的RNA分子中zui常见的和丰富的甲基化修饰和占所有RNA甲基化的80％以上。它可以被称为“第五RNA碱基”并且在调节胚胎发育和细胞命运中具有广泛的作用。

另一种是5-mC，5-甲基胞嘧啶（5-mC）是一种表观遗传标记，通常也出现在各种RNA分子中。有证据表明，RNA胞嘧啶甲基化会影响各种生物学过程，例如RNA稳定性和mRNA翻译。

zui后一种是m1A RNA甲基化，它普遍存在于非编码RNA和mRNA中。m1A RNA甲基化功能，目前发现tRNA上发生多种m1A修饰，可能参与翻译调控。

那接下来就谈谈RNA m6A甲基化。

N6-甲基腺苷（m6A）-真核生物中存在的RNA分子中zui常见和zui丰富的甲基化修饰。 被称为“第五个RNA碱基”的m6A RNA修饰是可逆的，高度动态的，并且可能起着与DNA甲基化和组蛋白修饰相当的重要生物学作用。

它的相关研究工具主要有m6A RNA定量试剂盒，甲基化酶和去甲基化酶活性/抑制剂分析试剂盒，以及相关的抗体。

1.m6A RNA甲基化定量检测试剂盒 #P-9005-48

一组优化的、完整的的试剂组合 M6A RNA甲基化定量检测试剂盒（比色法），可以通过比色的方法定量RNA中N6-甲基腺嘌呤（m6A）.它可以直接检测哺乳动物，植物，真菌细菌和病毒的总RNA样本的m6A的甲基化程度.

2.m6A甲基酶活性/抑制分析试剂盒，#P-9013-48

用于基于吸光度的核提取物或纯化酶中总m6A去甲基酶活性/抑制的测量，关键点：1. 检测多种物种中的m6A RNA去甲基化酶活性/抑制分析检测（哺乳动物，植物，真菌和细菌）；2. 使用m6A抗体的比色ELISA样测定；3. 检出限低至2ug 核提取物和50ng纯化的酶。

3.m6A RNA甲基化抗体

m6A RNA甲基化抗体，#A-1801-020

图左：The N6-methyladenosine (m6A) Polyclonal Antibody tested in dot blot against total RNA of Arabidopsis

图右ELISA performed at1:1000 dilution usingN6-methyladenosine (m6A) Polyclonal Antibody

http://www.amyjet.com/featured/5-mc.shtml