雌激素影响卵巢癌细胞系COC1 /DDP 顺铂耐药的蛋白质双向凝胶电泳图谱分析

【摘要】目的顺铂对细胞DNA 链作用具有选择性, 它对增生活跃的细胞, 特别是S 期细胞杀伤力强。将雌激素先作用卵巢癌细胞一定时间后再加入顺铂, 判断它能否作为促使癌细胞进入顺铂敏感期诱导剂并初步探讨雌激素协同顺铂的作用机制。方法选择人卵巢腺癌上皮细胞系COC1 和顺铂耐药系COC1 /DDP 为研究对象。MTT 法先测定预先加入雌激素16 h 对10 μmol /L 顺铂作用下的卵巢癌细胞生长影响。然后利用双向凝胶电泳分离预先加入50 μmol /L 雌激素16 h 与10 μmol /L 顺铂共同培养COC1 /DDP 和COC1 细胞48 h 的总蛋白,银染显色, Imagemaster 图像分析系统分析, 从胶中选取部份分离较好的差异蛋白质点, 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析获取肽质量指纹图谱, Peptident 软件搜索数据库鉴定蛋白质。结果雌激素促进顺铂对卵巢癌细胞系COC1 和COC1 /DDP 生长有抑制作用。获取了重复性和分辨率较好的50 μmol /L 雌激素与10 μmol /L顺铂共同培养的COC1 和COC1 /DDP 细胞双向凝胶电泳图谱。质谱分析了5 个蛋白质点, 获取了5 张肽质量指纹图谱。4 个可能参与雌激素促进顺铂效应蛋白质: COC1 中有锌指蛋白多型2 和FK506 结合蛋白5; COC1 /DDP中为微管β链蛋白和胞核包含颉酪肽蛋白相似蛋白。结论雌激素增加了卵巢癌细胞系COC1 /DDP 顺铂敏感性。雌激素协同顺铂抑制COC1 和COC1 /DDP 细胞生长中出现差异蛋白质对理解雌激素提高卵巢癌顺铂敏感性机制提供了有价值的信息。