桃果实蛋白质双向电泳影响因素的研究

摘　要: 以‘大久保’桃( Prunus persica L. ‘Okubao’) 果实为试材, 通过比较不同上样量、不同上样缓冲液、不同平衡缓冲液、不同染色方式等条件下的双向电泳图谱, 探讨以上各因素对桃果实双向电泳图谱效果的影响。结果表明考马斯亮蓝染色后的电泳图谱虽然蛋白质点的数量少于银染色后的图谱, 但背景较为清晰, 适用于蛋白质组分析。采用固相pH梯度17 cm胶条, 100μg蛋白质上样量, 样品干粉溶于375μL含有硫脲、磺基三甲基胺乙内脂3210的上样缓冲液中, 等电聚焦后用含有磷酸三丁酯的平衡缓冲液还原, 进行SDS2PAGE, 银染色得出的双向电泳图有蛋白点1 209个, 纹理较少, 适用于桃果实蛋白质组学分析且兼容于下游技术的蛋白质质谱鉴定。