变性高效液相色谱分析巯嘌呤甲基转移酶基因多态性位点
上一篇 /
下一篇 2009-01-07 23:18:16/ 个人分类:色谱
- 文件版本: V1.0
- 开发商: 本站原创
- 文件来源: 本地
- 界面语言: 简体中文
- 授权方式: 免费
- 运行平台: Win9X/Win2000/WinXP
摘要:目的
应用变性
高效液相色谱技术(DHPLC)
分析巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)
基因多态性位点。方法 用以PCR 为基础的DHPLC ,检测健康成人和脐血以及急性白血病病人,TPMT基因第5 外显子G238C、第7 外显子G460A 和第10 外显子A719G的3 个多态性位点。结果 健康成人、脐血和急性白血病病人全部DNA 样本,TPMT基因外显子区的3 个位点的多态性频率为3149 % ,远低于白种人和非洲人。变异的位点仅为第10 外显子A719G,且均为杂合变异。TPMT第5 外显子630 例标本的色谱峰均为单峰。第7 外显子有316 例为单峰,214(34 %) 为杂合峰。将单峰标本进行1∶1 混合后重新进样也有杂合峰出现。经DNA 测序分析,证实此区无序列变异;杂合峰标本在54 和60 ℃为单峰,55~59 ℃均为杂合峰。而单峰标本峰形未随温度发生变化。说明DHPLC的
检测误差并不是柱箱温度不合适引起的。第10 外显子有608 例为单峰,杂合峰为22 例,其中10/ 22 例标本进行DNA 直接测序,证实为杂合变异。结论 DHPLC技术能快速筛选出TPMT第5 和第10 外显子区的多态性位点,但不能检测出第7 外显子的多态性位点。因此,DHPLC不能作为单一方法进行TPMT基因多态性位点的检测。
下载提示:
1.您还没有登录,只有登录后才可以下载此资源,
,
2.如果您还没有注册,请
3.下载不减少用户积分。
收藏
分享给好友
推荐到圈子
管理
举报
TAG: 多态性酶基因巯嘌呤甲基转移