一种新的中心体蛋白质TACP1 与有丝分裂激酶N ek2A 相互作用的研究

[摘　要]　目的: 研究一种新的中心体蛋白TACP1 蛋白与有丝分裂激酶N ek2A 在有丝分裂期的相互作用关系。方法: 在大肠杆菌中表达和纯化的N ek2A 3052446蛋白与293T 细胞中表达的TACP1 蛋白, 进行体外pu ll2dow n 实验; TACP1 和N ek2A 两种质粒共转染293T 细胞, 用TACP1 多抗进行免疫共沉淀实验; Hela 细胞共转TACP1 和N ek2A , 利用间接免疫荧光的方法在荧光显微镜下观察两种蛋白的亚细胞定位。结果: TACP1 条带可以出现在大肠杆菌中表达和纯化的N ek2A 3052446泳道中,而对照组中无TACP1 条带。TACP1 抗体可以将细胞裂解液中的N ek2A 蛋白连同TACP1 蛋白一起沉淀下来, 而对照组免疫前的兔血清则不能将TACP1 或N ek2A 沉淀下来。在Hela 细胞有丝分裂
中期, TACP1 和N ek2A 都呈点状定位于中心体, 两者信号叠加后也重合。结论: 中心体蛋白TACP1在体内、体外能与有丝分裂激酶N ek2A 相互作用, 两者在细胞有丝分裂期都定位于中心体。