ONO- AE- 248 诱发中性粒细胞非凋亡性程序化死亡的蛋白质组学分析方法的建立

【摘要】目的：建立双向电泳技术和质谱技术在探索ONO- AE- 248诱发的中性粒细胞(neutrophil，PMN)非凋亡性程序化死亡的分子机理研究中的应用，为深入认识“非凋亡性程序化死亡”这种新的死亡方式提供新的有效的研究途径。方法：将采用梯度离心法分离的，人正常PMN，分为正常对照组和实验组，实验组用ONO- AE- 248刺激12小时建立非凋亡性坏死模型，提取对照组和实验组全蛋白，双向电泳分离蛋白质，采用PDQuest 2- DE软件分析找出两组间差异表达的蛋白质斑点，用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI- TOF-MS)进行鉴定。结果：双向电泳图谱显示：ONO- AE- 248诱导的人PMN非凋亡性程序化细胞死亡与PMN的自发性凋亡的蛋白质组存在差异显著，质谱鉴定初步得到其中12种差异表达的蛋白质。结论：双向电泳和质谱鉴定技术可以有效的分离和分析ONO- AE- 248诱发的PMN非凋亡性坏死的蛋白质组，为进一步探索“非凋亡性程序化死亡”方式提供了新的方法和途径，为丰富细胞死亡方式带来了新的前景。