高效液相色谱- 荧光衍生法在体内药物分析中的应用

摘要：体内药物分析是在大量复杂组分中进行微量或超微量药物及代谢产物的测定。体内药物分析最常用的检品是血样(血浆、血清、全血)、尿样、唾液及组织液, 特殊情况下也采用乳汁、泪液、胆汁、羊水、粪便等[1]。随着药物的开发研究, 药物
的服用剂量越来越小, 体内药物的浓度越来越低, 这对分析方法灵敏度和选择性等都提出很高的要求[2]。高效液相色谱法具有准确、灵敏度、专一性强等特点, 一直是体内药物分析的主要手段[3]。而高效液相色谱的荧光检测器比紫外吸收检测器灵敏度高。具有强紫外吸收的化合物检测灵敏度可达ng水平, 而荧光衍生物一般的检测水平为10-12～10-14m ol/L,灵敏度比紫外检测器提高10～1000 倍[4]。故H PLC 法结合荧光检测法所具有的较高的选择性及灵敏度以及试样用量少的特性, 使得对复杂生物样品中药物及其代谢物的测定变得更加灵敏、准确、快速。但荧光检测器要求被检测样品能被激发产生荧光. 对于不产生荧光或荧光较弱的样品灵敏度很低, 甚至不能检测。为了扩大检品范围, 提高检测灵敏度, 常采用荧光衍生法。荧光衍生法是指在一定条件下利用某种试剂与样品中待测组分相作用, 使其产物具有荧光或荧光增强。另外,荧光检测器选择性好, 过量的试剂和副产物往往不产生干扰, 衍生物亦不必纯化, 因此荧光衍生技术的采用, 扩大了高效液相色谱- 荧光测定法在体内药物分析中的应用范围, 为药物代谢动力学, 临床药理学和毒理学等研究提供科学依据。