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脂质体转染法转染细胞的依据

2018.8.13

荧光表达载体的导入

将构建好的荧光表达载体进行大量扩增,并通过质粒抽提试剂盒大量纯化,得到不含有内毒素的纯化质粒。将表达载体导入到培养细胞中后,经过培养即可进行荧光蛋白的检测。而将基因导入哺乳动物培养细胞的方法有很多种,生化转染法是很常用的导入培养细胞方法。常用的转染方法有

磷酸钙转染法和脂质体介导的转染法。这些方法都是通过

与化学试剂

磷酸钙或脂质体

形成复合物,促进

进入细胞。依据不同的细胞类型,采用不同的转染策略。磷酸钙转染法参考《分子克隆实验指南

》,而脂质体介导的转染法参考所使用脂质体的使用手册。

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细胞瞬时转染

细胞瞬时转染             实验方法原理 通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在

知识分享:细胞转染原理及常见转染方法的比较

。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。   理想

细胞瞬时转染步骤

原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用:观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间

细胞转染原理及常见转染方法的比较(一)

属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法,应该具有转染效率高

脂质体介导的细胞转染实验

实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法

细胞转染原理及常见转染方法的比较(二)

℃)、废液缸等。实验步骤(以脂质体转染为例):脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高,优于磷酸钙法,比它高5-100

干货∣细胞转染效率低下的八个大坑

上面都有,毛博不想再重复了。这里,毛博根据自己做细胞转染近10年的经验和体会,总结出了导致转染效率低下的八个大坑,以及避免掉坑里的一些做法。都是干货哟。  1.准备不足  做脂质体转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化

细胞转染(Cell Transfection)技术综述

一、细胞转染途径转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于物理介导技术;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染

转染和转染效率测定步骤

使用LIPOFECTAMINE,LIPOFECTIN,DMRIE-C或CELLFECTIN试剂在6孔板转染贴壁的哺乳动物细胞。使用这些试剂时,欲得到最佳转染效率,条件的优化必不可少。参考右侧阳离子脂质体试剂和DNA优化步骤。健康的,正在增生的

脂质体转染-仪器信息

;}     细胞转染 服务要求: 1.       客户需提供生长状况良好的宿主细胞株,一并提供细胞特性,培养条件及相关注意事项。 2.       客户需提供质粒,并说明质粒大小,浓度,抗性,拷贝数

最佳使用浓度。◇ 您只需提供:待转染细胞株及细胞培养的相关信息,待转染的质粒信息,目的蛋白一抗;待转染的SiRNA,预测被调控基因的蛋白的抗体。◇ 我们提供:瞬时转染的实验报告单,含实验原始实验图片

背景介绍慢病毒(lentivirus,lente-前缀在拉丁文中是“慢”的意思),是反转录病毒科下的一个属。慢病毒可以整合相当一部分的病毒RNA到宿主细胞的DNA中,并且可高效地感染非分裂细胞,因此

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