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琼脂糖凝胶电泳的注意事项

2021.5.22

实验步骤

一、试剂配制

1.  5×tbe缓冲液:450 mmol/l tris-硼酸,10 mmol/l edta,ph值8.0。使用时将上述储存液稀释10倍至0.5×tbe缓冲液,可同时作为电泳及制胶用的缓冲液。

二、制胶

1.  根椐制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过锥瓶的50%

容量)。琼脂糖粉末与0.5×tbe buffer的比例(w:v)参考表1,常用琼脂糖浓度为0.7-1%。

表1  琼脂糖凝胶浓度与线形dna的最佳分辨范围

琼脂糖浓度

最佳线形dna分辨范围(bp)

0.50%

1 000~30 000

0.7%

800~12 000

500~10 000

1.20%

400~7 000

1.50%

200~3 000

50~2 000

2%~5%

20~1 000

2.  在锥瓶......

......

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