pvdf膜甲醇浸泡久了

发布时间：2018-01-31

2、实验方法

（1）pdvf 膜及滤纸的预处理：剪裁与胶大小一致的 pvdf膜，将其浸入甲醇液中浸泡10 s（快速激活pdvf 膜），去离子水处理5min，1×转移缓冲液处理10min 以上。

（2）剪裁与胶同样大小的6层滤纸，用转移液缓冲液浸泡后待用。

（3）取下电泳板，将其平置（使凹面玻璃板在下），小心取出夹板中的垫片及去掉上层玻璃板，切除多余凝胶，将含样品胶在蒸馏水及1转膜液中各漂洗一次。

（4）转膜： ①将样品胶与膜装入标有正、负极的转膜夹板中：由正极侧开始，依次为海绵垫片→3层滤纸→pvdf膜→样品胶 →三层滤纸（排除气泡）→海棉垫片，扣紧转膜夹板，放入含有转膜缓冲液的转移电泳槽中。 ②正确连接转移电泳连线，使电荷由负极向正极流动。接通电源，恒压状态下，80v 转膜2 h（此操作在4℃冰箱中进行） ③小心取出转移膜（用铅笔轻轻描出蛋白marker带），在1......

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