2019.3.28
pvdf膜上蛋白的可逆染色可以用于:western杂交时,确认蛋白是否转至pvdf膜上。
实验方法原理
丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时也可以与蛋白质的非极性区相结合,从而形成红色的条带。
实验材料
试剂、试剂盒
amidoblack
isopropanol
aceticacid
考马斯亮蓝
methanol
ponceau s in tca
etoh
na2s2o3
ago3
na2co3
meoh
agno3
仪器、耗材
pvdf膜
实验步骤
1. 氨基黑染色
染液:0.5% amido black (w/v), 25% isopropa nol (v/v) and 10% acetic acid.
染色:将 pvdf 膜置于染液中染色数钟,dd
2. 考马斯亮蓝染色
染液:0.1% coomassie brillia nt ......
......
不能干,膜和蛋白性质都会受影响的。楼上两位的做法虽然也的确可以出结果,但是这种结果就比较不可靠了...
刚定的PVDF膜不知道怎麽用,请大家指点指点!
beta-actin 为43kd ,用的是湿转,200MA 1h, NC膜,可以成功将蛋白转到膜上,今天用的是pvdf膜,0...
分析测试,百科网,转膜时间过长,电压过大会不会对蛋白有影响, 定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题?电泳后的条带正常?可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜...
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DDDD.显色目的条带又细又浅,靶蛋白是27KD的bcl-xl和67KD 的c-myc,应该是高表达。每个涌道上50-70μg蛋白,开始用半干转移,后来用湿转14v,16h,用PVDF膜转移。胶...
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pvdf膜能吸附30kd的蛋白吗2022.1.21 11 这取决于膜的孔径和具体蛋白的性质30KDa的蛋白用0.45um的膜。甲醇活化后更容易吸附带负电的蛋白。 0 pvdf 互联网 喜...
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