2021.5.24
胰酶使用注意:
1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
贴壁细胞的消化:
1、吸去
液,用无菌的pbs、hanks液或无
培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清
2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)
下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全
细胞培养
液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。......
......
及温度等)、消化时的温度(气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度)以及所加胰酶溶液的多少等 。加入胰蛋白酶-EDTA溶液,视细胞瓶的大小加入体积为2ml或更多(依培养器皿的大小而定),以使充分浸润;一般消化时间约为1至3分钟,肉眼观察瓶底由半透明
本人也应对上述成分进行纯度鉴定。同时,正确配置和储存培养液及试剂也是非常重要的,应该采取标准的操作步骤,避免液体体积计算错误,混用类似化合物等错误。2.2.4 培养器皿及容器 细胞培养过程中会使用到各种不同的培养器皿及容器。培养器皿的大小
上述成分进行纯度鉴定。同时,正确配置和储存培养液及试剂也是非常重要的,应该采取标准的操作步骤,避免液体体积计算错误,混用类似化合物等错误。2.2.4 培养器皿及容器 细胞培养过程中会使用到各种不同的培养器皿及容器。培养器皿的大小,构形设计可能会
。同时,正确配置和储存培养液及试剂也是非常重要的,应该采取标准的操作步骤,避免液体体积计算错误,混用类似化合物等错误。2.2.4 培养器皿及容器 细胞培养过程中会使用到各种不同的培养器皿及容器。培养器皿的大小,构形设计可能会影响到培养中气
的大小,构形设计可能会影响到培养中气体交换、湿度、培养液的pH值和细胞生长密度。培养器 皿的工艺及灭菌过程中的差异可能对培养体系产生影响。塑料制品在生产过程中可能残留一些有毒成形剂,生产工艺的不同可能引起器皿表面附着能力的不同。储存 不同
。(1)紫外线:主要用于消毒实验室空气、工作台面和一些不能使用其他方法消毒的培养器皿。进无菌室前或做完实验后,均应开灯照射30min进行消毒。紫外线照射60min可以消灭空气中大部分细菌。(2)消毒剂:操作者的皮肤、培养瓶的盖和外壁常用点酒
疗法,能取代现有受培养器皿表面积制约的批量技术。 传统细胞培养方法,通常在实验室培养瓶中进行,然后用化学方法或酶技术分离,因此只能一次次批量生产,培养瓶的表面大小制约着获得的细胞数量,成为细胞治疗技术发展的公认瓶颈。而目前连续化生物过程只用
疗法,能取代现有受培养器皿表面积制约的批量技术。 传统细胞培养方法,通常在实验室培养瓶中进行,然后用化学方法或酶技术分离,因此只能一次次批量生产,培养瓶的表面大小制约着获得的细胞数量,成为细胞治疗技术发展的公认瓶颈。而目前连续化生物过程只用
玻璃器皿是化学分析实验中,使用范围广、频率多的器具之一,玻璃量器的准确度会影响到实验数据的准确性,但人们对它的关注及维护保养远不及其它精密仪器,往往忽视掉药典和法规中对玻璃器皿的要求,使得一些不合规的玻璃器皿在实验过程中造成数据的偏差
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