复方利福平片中异烟肼和吡嗪酰胺的含量测定方法
复方利福平片中异烟肼和吡嗪酰胺的含量测定方法
毛细管气相色谱法测异烟肼和吡嗪酰胺的含量
目的：建立复方利福平片中异烟肼和吡嗪酰胺的含量测定方法。
方法：毛细管气相色谱法，以乙酰苯胺为内标，色谱柱为弹性石英毛细管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)柱温170℃;气化室温度250℃;检测器温度250℃;载气为高纯氮。
结果：异烟肼和吡嗪酰胺的线性范围分别是0.426～2.13mg/ml和1.23～6.13mg/ml;平均回收率分别为99.81%和99.63%。
结论：方法简便，快速，准确，可作为该制剂的检测方法。
关键词 毛细管气相色谱法；异烟肼；吡嗪酰胺；含量测定
复方利福平片含利福平、异烟肼和吡嗪酰胺三主药，临床主要应用于治疗结核病，目前，国内市场为进口制剂。关于该进口制剂中各组分的含量测定方法，文献报道有紫外分光光度法［1］和液相色谱法［2］，本文采用毛细管气相色谱法建立了国产仿制药复方利福平片中异烟肼和吡嗪酰胺的含量测定方法。
1 仪器、药品和试剂
南京科捷分析仪器有限公司的GC5890气相色谱仪，毛细管进样系统，氢火焰离子化检测器。
异烟肼，吡嗪酰胺和利福平原料药，对照品(中国药品生物制品检定所)，内标：乙酰苯胺为分析纯。
2 方法和结果
2.1 色谱条件
色谱柱：弹性石英毛细管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)。
色谱条件：柱温170℃;气化室温度250℃;检测器温度250℃;载气为高纯氮，柱前压0.6MPa;分流进样，分流比为40∶1。
2.2 干扰试验
按处方比配制异烟肼和吡嗪酰胺乙酸乙酯溶液1份，另取利福平及空白辅料乙酸乙酯溶液一份，分别取1～3μl注入气相色谱仪，利福平和空白辅料对异烟肼和吡嗪酰胺测定无干扰。
2.3 标准曲线的制备
取乙酰苯胺适量，加乙酸乙酯溶解并稀释成每1ml中含6mg的溶液，摇匀，作为内标溶液，备用。另取异烟肼对照品和吡嗪酰胺对照品适量，置100ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释成每1ml中含异烟肼4mg,吡嗪酰胺12mg的对照品贮备液，另取上述贮备液1.0,2.0,3,0,4.0和5.0ml,置10ml量瓶中，加入内标溶液2.0ml,用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，放置，取2μl注入气相色谱仪，以对照品与内标的浓度比作为横坐标，峰面积比为纵坐标，进行回归分析，得回归方程异烟肼为:Y=-0.2008X+0.5236,r=0.9992,线性范围为0.426～2.13mg/ml；吡嗪酰胺为:Y=-0.0815X+0.6134,r=0.9998,线性范围为1.23～6.13mg/ml。
2.4 回收率试验
量取2.3项下对照品贮备液1.5,2.0,2.5,3.0和3.5ml,置10ml量瓶中，加入内标溶液2ml,再加入按处方配比的利福平及空白辅料，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，取上清液2μl注入气相色谱仪，按回归方程计算回收率，结果见表1，2。
表1 吡嗪酰胺回收率试验结果
加入量 | 测得量 | 回收率 | 平均回收 | RSD | |
1 | 18.47 | 17.91 | 99.97 | ||
2 | 24.62 | 24.53 | 99.63 | ||
3 | 30.78 | 30.51 | 99.13 | 99.63 | 1.8 |
4 | 36.93 | 37.62 | 101.87 | ||
5 | 40.09 | 40.32 | 100.57 |
毛细管气相色谱法测异烟肼和吡嗪酰胺的含量
气相色谱仪---南京科捷分析研究所
复方利福平片中异烟肼和吡嗪酰胺的含量测定方法
