考马斯亮蓝G-250 与蛋白质结合的反应十分迅速且稳定,这一方法具有灵敏度高、干扰物质少、测定快速、简便等优点,不受酚类、游离氨基酸和缓冲剂、络合剂的影响,适合大量样品的测定,可推广到其他乳制品及保健食品、植物蛋白饮料等中的蛋白质测定。但由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此用于不同蛋白质测定时有较大的偏差。...
缺点:①测定蛋白质含量的准确度较差,专一性差; ②干扰物质多,若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等能吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。5、考马斯亮蓝法考马斯亮蓝显色法的基本原理是根据蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后,其对可见光的最大吸收峰从 465nm 变为 595nm。...
考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸:将 100 mg 考马斯蓝溶于 50 ml 95% 乙醇,加人 100 ml 85% 磷酸;然后以 1L 水稀释。蛋白质标准溶液(如 BSAlOpg/ml);设计实验,然后间隔 1~2 个月,以 BSA 或相似的标准蛋白质(1 50ug/ml) 制作标准曲线。...
李宁对凯氏定氮法、考马斯亮蓝法和双缩脲法进行了比较, 得出结论为, 凯氏定氮法、双缩脲法和考马斯亮蓝染色法都可以测出被测的全部5 种样品的蛋白质含量, 其中凯氏定氮法是目前分析有机化合物含氮量常用的方法, 是一种蛋白质测定的经典方法,适用样品广泛和用于结果要求准确的测试; 双缩脲法和考马斯亮蓝染色法的测试过程简便、迅速, 用于可以准确配取标准蛋白溶液而准确性要求不高的测试中。...
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